Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι ένα σύγχρονο διαγνωστικό εργαλείο για μια ποικιλία λοιμώξεων με υψηλή ακρίβεια. Η ανάλυση PCR σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε τους αιτιολογικούς παράγοντες των μολυσματικών ασθενειών, με βάση το γενετικό τους υλικό (RNA ή DNA). Βιολογικό υλικό για έρευνα μπορεί να είναι αίμα, επίχρισμα από τα γεννητικά όργανα, σάλιο κ.λπ.

ΔΙΑΒΟΥΛΕΥΣΗ ΣΧΕΤΙΚΑ ΜΕ ΤΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ ΑΝΑΛΥΣΗΣ ή υπερήχου - 500 ρούβλια.

Η μέθοδος PCR ανακαλύφθηκε το 1983. Δημιουργός της είναι ο Carey Mullis (ΗΠΑ), για την ανακάλυψη αυτή έλαβε το Νόμπελ Χημείας. Ήδη από τα πρώτα δέκα χρόνια, η τεχνική έχει γίνει υποχρεωτική εργαστηριακή μελέτη σε όλο τον κόσμο, έχοντας λάβει αναγνώριση από επιστήμονες και γιατρούς.

Το Diana Medical Center προσφέρει τη διεξαγωγή μελέτης με τη μέθοδο της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης στο συντομότερο δυνατό χρόνο και με το υψηλότερο επίπεδο ακρίβειας. Η διαγνωστική μας βάση πληροί όλα τα διεθνή πρότυπα και απαιτήσεις.

Ποιες λοιμώξεις μπορούν να διαγνωστούν με PCR

Αποστολή για διαγνωστικά ή. ΕΝΑανάλυση PCRκαθιστά δυνατή τη διάγνωση μιας μεγάλης ποικιλίας λοιμώξεων. Αυτή η ομάδα περιλαμβάνει επίσης κρυφές, ασυμπτωματικές ασθένειες που βρίσκονται στην περίοδο επώασης:

Με τη χρήση Μέθοδος PCRμπορείς να βρεις:

• ηπατίτιδα C, B;
• ουρεαπλάσμωση των γεννητικών οργάνων.
• - ουρεαπλάσμωση, τριχομονάση, γαρδνερέλωση.
• χλαμύδια των γεννητικών οργάνων και της αναπνευστικής οδού.
• βακτηριακή κολπίτιδα?
• Λοιμώδης μονοπυρήνωση;
• φυματίωση;
• σαλμονέλωση;
• φυματίωση (πνευμονικές και εξωπνευμονικές μορφές).
• λιστερίωση, εγκεφαλίτιδα που μεταδίδεται από κρότωνες, νόσος του Lyme;
• , ιός θηλώματος,;
• μολυσματικές ασθένειες της παιδικής ηλικίας που εντοπίστηκαν κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης και πριν από τη σύλληψη - παρωτίτιδα, διφθερίτιδα, ιλαρά.
• HIV.

Για καθεμία από τις παραπάνω ασθένειες, που ανιχνεύεται με άλλη μέθοδο, καλό είναι να γίνει μελέτη PCR. Οι αιτιολογικοί παράγοντες πολλών λοιμώξεων είναι διαφόρων τύπων (στελέχη) και η ακριβέστερη διάγνωση καθιστά τη θεραπεία πιο αποτελεσματική. Δεδομένου ότι διαφορετικοί τύποι παθογόνων έχουν τους δικούς τους τρόπους μετάδοσης, η ακριβής αναγνώριση του παθογόνου βοηθά στην προστασία άλλων από μόλυνση. Για παράδειγμα, η ηπατίτιδα Α μπορεί να προσβληθεί μέσω κοινών αντικειμένων και σκευών (νόσος των βρώμικων χεριών) και η ηπατίτιδα C μπορεί να μεταδοθεί μόνο μέσω αίματος, ιατρικών εργαλείων και σεξουαλικής επαφής. Αυτό είναι σημαντικό για όσους βρίσκονται κοντά στον ασθενή.

Η ουσία της μεθόδου αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης

Η μέθοδος βασίζεται στην αναγνώριση του παθογόνου από τμήματα DNA ή RNA. Η PCR είναι παρόμοια με την ιατροδικαστική επιστήμη, όταν ένας εγκληματίας εντοπίζεται από σωματίδια δέρματος ή μαλλιών που αφήνονται στον τόπο του εγκλήματος. Επειδή κάθε ζωντανός οργανισμός έχει μια μοναδική δομή DNA ή RNA. Η μέθοδος σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε με ακρίβεια έναν μικροοργανισμό, ακόμη κι αν υπάρχει στο υλικό δοκιμής σε ελάχιστες ποσότητες.

Η PCR είναι κατάλληλη για την ανίχνευση κρυφών φορέων, άτυπων, διαγραμμένων και άλλων μορφών μολυσματικών ασθενειών. Τα διαγνωστικά είναι εξαιρετικά ακριβή, επομένως πρακτικά δεν δίνουν σφάλματα και ψευδή αποτελέσματα. Μια ανάλυση συχνά συνταγογραφείται ως πρόσθετη εξέταση για τον εντοπισμό ενός συγκεκριμένου τύπου ιού ή μικροβίου.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της μεθόδου PCR

Η ανάλυση PCR είναι ένα αποτελεσματικό διαγνωστικό εργαλείο που επιτρέπει στον γιατρό όχι μόνο να προσδιορίσει σωστά τον τύπο του μολυσματικού παράγοντα στο σώμα του ασθενούς, αλλά και τον αριθμό των μικροβίων. Αυτό το χαρακτηριστικό επιτρέπει στη μέθοδο PCR να ανιχνεύει αποτελεσματικά χρόνιες λοιμώξεις, για παράδειγμα, ιογενή ηπατίτιδα.

Τα πλεονεκτήματα της τεχνικής είναι τα εξής:

• Ευστροφία ... Η μέθοδος καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό όλων των επί του παρόντος γνωστών μικροοργανισμών, ανεξάρτητα από τον τύπο του υλικού που μελετάται.
• Ιδιαιτερότητα ... Η PCR σας επιτρέπει να προσδιορίσετε το DNA ενός ιού ή ενός βακτηρίου με 100% ακρίβεια, κάτι που δεν παρέχει καμία άλλη διαγνωστική μέθοδο.
• Ευαισθησία - Ακόμη και ένα μικροσκοπικό «θραύσμα» DNA ή RNA μπορεί να ανιχνευθεί και να αναγνωριστεί χάρη στην γρήγορη αντίδραση αντιγραφής.
• Προθυμία - είναι δυνατό να γίνει διάγνωση με βάση την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης μέσα σε λίγες ώρες μετά τη λήψη του βιολογικού υλικού, γεγονός που καθιστά δυνατή την έγκαιρη έναρξη της θεραπείας της νόσου.
• Δυνατότητα ποσοτικής ανάλυσης ... Αυτό το χαρακτηριστικό είναι σημαντικό για τον εντοπισμό ασθενειών που προκαλούνται από ευκαιριακή χλωρίδα (για παράδειγμα, τσίχλα). Η αυξημένη περιεκτικότητα σε μύκητες candida στο σώμα προκαλεί την ασθένεια και η κανονική ποσότητα είναι μέχρι 10 3 - 104 CFU / tamp. - Οχι.

Τα μειονεκτήματα των διαγνωστικών PCR είναι η ανάγκη για εξοπλισμό υψηλής τεχνολογίας και υψηλά καταρτισμένους ειδικούς. Για την ανάλυση χρειάζεται ένα ειδικό laminar κουτί, όπου διατηρείται η απαιτούμενη θερμοκρασία και διασφαλίζεται η καθαρότητα του πειράματος.

Πώς να περάσετε σωστά τη δοκιμή PCR: προετοιμασία

Για να κατανοήσει ακριβώς πώς να προετοιμαστεί για την επερχόμενη ανάλυση PCR, ο ασθενής θα πρέπει οπωσδήποτε να ελέγξει με το γιατρό του τι είδους βιολογικό υλικό σχεδιάζεται να ληφθεί. Η προετοιμασία εξαρτάται άμεσα από αυτό.

• Απόρριψη από τα γεννητικά όργανα, επίχρισμα από τον τράχηλο ή την ουρήθρα, ούρα - μέσω της μελέτης αυτών των παραλλαγών του υλικού με τη μέθοδο PCR, διαγιγνώσκονται αποτελεσματικά οι λοιμώξεις των γεννητικών οργάνων.
• Η ιογενής ηπατίτιδα C, η HIV λοίμωξη απαιτούν συλλογή αίματος για ανάλυση PCR.
• Χρησιμοποιώντας ένα μάκτρο λαιμού, μπορείτε να επιβεβαιώσετε ή να αρνηθείτε την παρουσία λοιμώδους μονοπυρήνωσης.

Επίχρισμα στις γυναίκες

Για τη διάγνωση των λοιμώξεων των γεννητικών οργάνων με PCR στις γυναίκες, κατά κανόνα, λαμβάνουν κολπικό επίχρισμα... Κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, ισχύουν οι τυπικοί κανόνες προετοιμασίας για την ανάλυση PCR.

• Μερικές μέρες πριν από την PCR, πρέπει να εγκαταλείψετε το πλύσιμο, τα προϊόντα προσωπικής υγιεινής.
• Μια εβδομάδα πριν από την ανάλυση για λοιμώξεις, αξίζει να σταματήσετε τη χρήση οποιουδήποτε τύπου φαρμάκων, φυσικά, εάν δεν περιλαμβάνονται στο πρόγραμμα προετοιμασίας για την ανάλυση PCR που συνταγογραφεί ο γιατρός.
• Λίγες μέρες πριν από την εξέταση, πρέπει να ξεκινήσετε την αποχή από τη σεξουαλική επαφή.
• Το πλύσιμο την ημέρα της ανάλυσης PCR δεν είναι απαραίτητο, η υγιεινή των γεννητικών οργάνων πραγματοποιείται το προηγούμενο βράδυ, χρησιμοποιείται μόνο ζεστό νερό.
• Δεν μπορείτε να ουρήσετε μερικές ώρες πριν από την εξέταση.

Επίχρισμα στους άνδρες

Η προετοιμασία για τη συλλογή ενός επιχρίσματος από την ουρήθρα για PCR είναι εύκολη. Αρκεί να ακολουθήσετε τους κανόνες που αναφέρονται παρακάτω.

• 2 ημέρες πριν από την εξέταση PCR, πρέπει να ξεκινήσετε την αποχή από τις σεξουαλικές σχέσεις.
• Η φαρμακευτική αγωγή διακόπτεται περίπου 7 ημέρες πριν από την ανάλυση, εκτός εάν, φυσικά, έχουν συνταγογραφηθεί ειδικά από τον γιατρό.
• Η υγιεινή των γεννητικών οργάνων θα πρέπει να γίνεται το προηγούμενο βράδυ· την ημέρα της ανάλυσης PCR, αυτό δεν πρέπει να γίνεται.
• Συνιστάται να μην ουρείτε για περίπου 2-3 ​​ώρες πριν κάνετε την εξέταση.

Εξέταση αίματος

Εάν κατά τη διαδικασία της ανάλυσης PCR το αίμα του ασθενούς γίνει αντικείμενο μελέτης, οι κανόνες προετοιμασίας για αυτό είναι οι ακόλουθοι.

• Η βέλτιστη ώρα για αιμοδοσία είναι το πρωί, η εξέταση πρέπει να γίνεται με άδειο στομάχι (τουλάχιστον 8 ώρες χωρίς φαγητό). Το νερό μπορεί να πιει ελεύθερα.
• Διακοπή αλκοόλ μία ημέρα πριν από την εξέταση PCR, διακοπή του καπνίσματος μία ώρα πριν.
• Εάν η υγεία επιτρέπει μια τέτοια επιλογή, συνιστάται να σταματήσετε να παίρνετε φάρμακα για λίγο.
• Πριν από τη λήψη δειγμάτων αίματος, είναι επιτακτική ανάγκη να ξεκουραστείτε για περίπου 20 λεπτά.
• Την παραμονή των μελετών PCR, οι συναισθηματικές και σωματικές υπερφορτώσεις αποκλείονται εντελώς, μπορούν να επηρεάσουν τα αποτελέσματα της ανάλυσης.

Πώς γίνεται η εξέταση PCR;

Για την έρευνα, λαμβάνεται οποιοδήποτε περιβάλλον στο οποίο μπορεί να εντοπιστεί το παθογόνο, αλλά πιο συχνά χρησιμοποιούνται:

• Ορός αίματος ή πλάσμα - για τον εντοπισμό μιας ποικιλίας παθογόνων - ιών ηπατίτιδας B, C, D, G, έρπης, HIV, κυτταρομεγαλοϊός.
• Χυμός ούρων και προστάτη - στη διάγνωση των ΣΜΝ.
• Πτύελα, υπεζωκοτικό υγρό, βρογχοκυψελιδική πλύση - για τη διάγνωση πνευμονικών και εξωπνευμονικών μορφών φυματίωσης.
• Εγκεφαλονωτιαίο υγρό - για τη διάγνωση λοιμώξεων του νευρικού συστήματος.
• Αμνιακό υγρό - για τον προσδιορισμό των ενδομήτριων λοιμώξεων.
• Μάκτρο λαιμού - για τον εντοπισμό των αιτιολογικών παραγόντων της λοιμώδους μονοπυρήνωσης και της διφθερίτιδας.
  Ξύσεις και επιχρίσματα από τους βλεννογόνους για τη διάγνωση των ΣΜΝ.
  κύτταρα του γαστρικού βλεννογόνου και του γαστρικού υγρού - για τον εντοπισμό του βακτηρίου Helicobacter, που προκαλεί γαστρίτιδα και έλκη.

Με μία δειγματοληψία του υλικού, πολλά παθογόνα που έχουν εισέλθει στο σώμα μπορούν να ανιχνευθούν ταυτόχρονα. Αυτή η ευελιξία σώζει τον ασθενή από πρόσθετες εξετάσεις και περιττά έξοδα.

Είναι δυνατός ο εντοπισμός και η αναγνώριση τμημάτων γενετικής πληροφορίας χρησιμοποιώντας ειδικούς δείκτες DNA αναφοράς (primers) που δημιουργήθηκαν για κάθε γνωστό παθογόνο. Το πρότυπο σάς επιτρέπει να βρείτε το "δικό σας" κομμάτι ανάμεσα σε εκατομμύρια άλλα. Εάν συμβεί αυτό, ενεργοποιείται η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

Η αντίδραση PCR δημιουργεί έναν τεράστιο αριθμό αντιγράφων της αναγνωρισμένης περιοχής πληροφοριών γονιδίου (αντιγραφή). Είναι σημαντικό να αντιγράφονται μόνο οι περιοχές DNA και RNA που χρειάζονται για την ανάλυση. Επομένως, η καθαρότητα του πειράματος και η ικανότητα του προσωπικού να χειρίζεται εξοπλισμό και δείγματα είναι τόσο σημαντικά.

Η αλυσιδωτή αντίδραση προχωρά πολύ γρήγορα, μετά από δύο ώρες το τμήμα DNA μεγεθύνεται εκατομμύρια φορές, γεγονός που καθιστά δυνατό τον εντοπισμό και την ακριβή αναγνώριση της μόλυνσης. Για να εργαστούν με πρότυπα, οι δοκιμαστικοί σωλήνες τοποθετούνται σε ειδική συσκευή. Με τη βοήθεια του προγράμματος τίθεται ένας αλγόριθμος που αλλάζει τη θερμοκρασία του μέσου αρκετές φορές και επηρεάζει την πορεία της αντίδρασης. Το αποτέλεσμα της PCR είναι ορατό αμέσως μετά το τέλος της μελέτης.

Πώς να αποκωδικοποιήσετε την ανάλυση PCR

Η διεξαγωγή μιας μελέτης PCR επιτρέπει όχι μόνο να διαπιστωθεί ο τύπος της λοίμωξης που υπάρχει στο σώμα του ασθενούς, αλλά και να αξιολογηθεί από ποσοτική άποψη (ο αριθμός των μικροβίων). Η αποκρυπτογράφηση των ποσοτικών αποτελεσμάτων PCR παίζει σημαντικό ρόλο στην ανίχνευση και την επαλήθευση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας για μεγάλο αριθμό χρόνιων ασθενειών, όπως η ηπατίτιδα C.

Το αποτέλεσμα της ανάλυσης PCR μπορεί να είναι θετικές και αρνητικές απαντήσεις.

• Αρνητικό αποτέλεσμα ... Δεν εντοπίστηκαν ίχνη μόλυνσης στο βιολογικό υλικό, το οποίο ήταν το αντικείμενο της μελέτης κατά την ανάλυση PCR. Κατά κανόνα, με βάση ένα αρνητικό αποτέλεσμα, μπορεί να υποτεθεί ότι όντως δεν υπάρχει μόλυνση στο σώμα.
• Θετικό αποτέλεσμα. Αυτό το αποτέλεσμα της ανάλυσης PCR δείχνει ότι υπάρχουν ίχνη μολυσματικής νόσου στο βιολογικό υλικό του ασθενούς. Ένα θετικό αποτέλεσμα δοκιμής PCR χαρακτηρίζεται από υψηλό βαθμό ακρίβειας.

Μερικές φορές η μόλυνση ανιχνεύεται στο πλαίσιο της πλήρους υγείας και της απουσίας σημείων της νόσου. Μερικοί ασθενείς πιστεύουν ότι η ανάλυση έγινε εσφαλμένα, αλλά η πραγματική κατάσταση είναι διαφορετική. Εάν η PCR έδειξε ότι υπάρχει ένα παθογόνο στο σώμα, τότε είναι πραγματικά εκεί. Απλώς οι μολυσματικές ασθένειες δεν ξεκινούν ποτέ αμέσως μετά τη μόλυνση, έχοντας μια περίοδο επώασης ποικίλης διάρκειας.

Η λανθάνουσα περίοδος μπορεί να διαρκέσει για πολύ μεγάλο χρονικό διάστημα, για παράδειγμα, στο AIDS - αρκετά χρόνια, έως ότου κάποιοι μηχανισμοί ωθήσουν τους ιούς να πολλαπλασιαστούν. Το παθογόνο προσδιορίζεται στο σώμα των φορέων και εκείνων που δεν έχουν θεραπευτεί. Πολύ συχνά διάφορα ΣΜΝ μετατρέπονται σε λανθάνουσα (λανθάνουσα) μορφή. Σε αυτήν την περίπτωση, ενδέχεται να απαιτηθούν πρόσθετες εργαστηριακές διαγνωστικές εξετάσεις.

Ακρίβεια ερμηνείας των αποτελεσμάτων της ανάλυσης PCR

Η μέθοδος PCR, η οποία επιτρέπει την ανίχνευση ενός αρκετά μεγάλου αριθμού λοιμώξεων, χαρακτηρίζεται από αυξημένη ακρίβεια, ευαισθησία και ειδικότητα. Αυτά τα χαρακτηριστικά δείχνουν ότι χρησιμοποιώντας μια μελέτη PCR μπορείτε:

• Διαπιστώστε όσο το δυνατόν ακριβέστερα την απουσία ή την παρουσία μολυσματικού παράγοντα.
• Προσδιορίστε όσο το δυνατόν ακριβέστερα τον συγκεκριμένο τύπο μολυσματικού παράγοντα (ειδικότητα).
• Προσδιορίστε τη μόλυνση ακόμα κι αν είναι λανθάνουσα. Μιλάμε για χαμηλό επίπεδο μικροβιακού DNA (ευαισθησίας) στο υπό εξέταση βιολογικό υλικό του ασθενούς.

Τα πλεονεκτήματα της μεθόδου PCR έναντι της συνδεδεμένης με ένζυμο ανοσοπροσροφητικής δοκιμασίας και άλλων ανοσολογικών εργαλείων για την ανίχνευση λοίμωξης είναι ότι είναι λιγότερο πιθανό να δώσει λανθασμένα αποτελέσματα. Δηλαδή, η αποκωδικοποίηση της ανάλυσης PCR πολύ σπανιότερα δείχνει την απουσία μολυσματικών μικροβίων, εάν βρίσκονται στο σώμα του ασθενούς.

Επιπλέον, δεν συμβαίνει σχεδόν ποτέ η αποκωδικοποίηση της ανάλυσης να αποκαλύψει την ύπαρξη ανύπαρκτης λοίμωξης στον οργανισμό, δηλαδή να δώσει ψευδώς θετικά αποτελέσματα.Φυσικά, εξακολουθεί να είναι αδύνατο να ονομάσουμε τα αποτελέσματα της PCR 100% σωστά, επομένως είναι απαραίτητο να συμπληρωθεί αυτή η μελέτη με άλλες μεθόδους.

Περιεχόμενο

Όσοι ενδιαφέρονται για νέες διαγνωστικές μεθόδους θα πρέπει να μάθουν ποια είναι η μέθοδος PCR. Οι σύγχρονες τεχνικές δυνατότητες στον τομέα της εργαστηριακής έρευνας παρέχουν τη δυνατότητα ανίχνευσης πολλών ασθενειών στα αρχικά στάδια. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) θεωρείται σήμερα η πιο ακριβής και νέα μέθοδος.

Ανάλυση PCR

Ανάλυση PCR - τι είναι; Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί τις αρχές της μοριακής βιολογίας. Για τη μελέτη του υλικού, χρησιμοποιούνται ειδικά ένζυμα που αντιγράφουν επανειλημμένα και γρήγορα θραύσματα DNA, RNA παθογόνων. Υπάρχουν διάφοροι τύποι ανάλυσης PCR ανάλογα με το υλικό δοκιμής (αίμα, ούρα, κόπρανα κ.λπ.). Μετά την επεξεργασία, το προσωπικό του εργαστηρίου συγκρίνει το ληφθέν αποτέλεσμα με τη βάση δεδομένων, προσδιορίζει τη συγκέντρωση, τον τύπο του παθογόνου.

Η ανάλυση PCR τοποθετείται σε ειδικό ενισχυτή (συσκευή), ο οποίος θερμαίνει και ψύχει τους σωλήνες με βιοϋλικό. Απαιτούνται αλλαγές θερμοκρασίας για την αναπαραγωγή των θραυσμάτων. Η ακρίβεια του αποτελέσματος θα εξαρτηθεί από την ακρίβεια του καθεστώτος θερμοκρασίας. Η μέθοδος αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης βοηθά στον εντοπισμό:

• Λοιμώδης μονοπυρήνωση;
• λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊό;
• ιογενής ηπατίτιδα G, C, B, A;
• Σεξουαλικά μεταδιδόμενες λοιμώξεις / ασθένειες (ΣΜΝ / ΣΜΝ): γκαρδερέλωση, τριχομονάση, ουρεαπλάσμωση.
• μόλυνση από έρπητα?
• ογκογόνοι ιοί;
• λιστερίωση;
• Λοίμωξη από ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού;
• εγκεφαλίτιδα που μεταδίδεται από κρότωνες, μπορελίωση.
• φυματίωση;
• καντιντίαση.

Αίμα

Αυτή τη στιγμή, λόγω της καινοτομίας της τεχνολογίας, η εξέταση αίματος PCR εξακολουθεί να έχει υψηλό κόστος. Για να προετοιμάσετε ένα βιοϋλικό, δεν χρειάζεται να συμμορφώνεστε με ορισμένες απαιτήσεις. Ακόμη και οι αλλαγές στη σύνθεση που προκαλούνται από σωματική καταπόνηση, στρες και αλλαγή στη διατροφή δεν επηρεάζουν το αποτέλεσμα της μελέτης. Μια εξέταση αίματος PCR μπορεί μόνο να χαλάσει την πρόσληψη αντιβακτηριακών παραγόντων, επομένως, πριν τη λήψη, είναι απαραίτητο να κάνετε μια παύση μεταξύ της θεραπείας και της εξέτασης.

Η εξέταση αίματος PCR είναι η πιο κοινή επιλογή για τη διάγνωση χρόνιων, οξέων λοιμωδών παθολογιών με ιογενή ή άτυπη εκδήλωση. Οι μέθοδοι ορολογικής έρευνας έχουν κάποια δυσκολία στη διεξαγωγή - ο προσδιορισμός της παρουσίας του παθογόνου πραγματοποιείται με την παρουσία αντισωμάτων στο ανθρώπινο σώμα. Το αποτέλεσμα θα μπορούσε να είναι ψευδώς αρνητικό εάν η κατάσταση του ασθενούς δεν έδινε χρόνο για την ανάπτυξή του.

Κηλίδα

Στον τομέα της γυναικολογίας, η ανάλυση επιχρίσματος PCR χρησιμοποιείται για τη διερεύνηση της παρουσίας μολυσματικών μικροοργανισμών. Η εργασία με το υλικό πραγματοποιείται σύμφωνα με την ίδια αρχή όπως και με το αίμα: πολλαπλή αύξηση των θραυσμάτων DNA του παθογόνου για την εύκολη αναγνώριση του. Βοηθά επίσης στον εντοπισμό κρυφών λοιμώξεων σε μια γυναίκα. Για την ανάλυση, μπορούν να ληφθούν διαφορετικά βιολογικά υγρά: σάλιο, πτύελα, ούρα, αίμα. Στη γυναικολογία, για την ακρίβεια του προσδιορισμού, χρησιμοποιείται συχνά ένα επίχρισμα από τον κολπικό βλεννογόνο από τον αυχενικό σωλήνα.

Υπάρχουν ορισμένες ενδείξεις για PCR. Συχνά χρειάζεται να γίνει για να εντοπιστεί ένα παθογόνο ανθεκτικό στα αντιβιοτικά. Στις γυναίκες, οι κύριες ενδείξεις για τη διάγνωση με τη χρήση αυτής της μεθόδου είναι:

• εγκυμοσύνη που είναι δύσκολη.
• οξεία φάση ΣΜΝ.
• εάν υπάρχει υποψία μετάβασης των ΣΜΝ στο χρόνιο στάδιο.
• αναζήτηση των αιτιών της υπογονιμότητας.

Καλά

Για την ανίχνευση λοίμωξης, ο γιατρός μπορεί να συνταγογραφήσει μια εξέταση PCR κοπράνων. Για να αποκτήσετε τα πιο αξιόπιστα αποτελέσματα μετά τη δοκιμή, πρέπει να τηρείτε τους ακόλουθους κανόνες πριν από τη δειγματοληψία βιοϋλικού:

• σταματήστε να παίρνετε καθαρτικά σε λίγες μέρες: έλαια, υπόθετα.
• εξαιρέστε φάρμακα που δίνουν συγκεκριμένο χρώμα στα κόπρανα, για παράδειγμα, με περιεκτικότητα σε σίδηρο.

Για τη συλλογή πρέπει να χρησιμοποιείται αποστειρωμένο ραβδί και δοχείο. Σκουπίστε τα με οτιδήποτε άλλο, δεν χρειάζεται να τα ξεπλύνετε. Κατά τη συλλογή υλικού, προσέξτε να μην αγγίξετε το εσωτερικό του δοχείου με το χέρι σας. Βεβαιωθείτε ότι δεν υπάρχουν ακαθαρσίες ούρων στα κόπρανα, δεν μπορείτε να χρησιμοποιήσετε πρόσθετα βοηθήματα για τις κινήσεις του εντέρου (κλύσμα). Πρέπει να συλλέξετε το υλικό την ημέρα της παράδοσης, το 1/3 του όγκου του δοχείου είναι αρκετό. Αυτή η διαγνωστική μέθοδος έχει τα ακόλουθα πλεονεκτήματα:

Ούρο

Εάν είναι απαραίτητο, ο γιατρός μπορεί να πάρει ούρα για εξέταση για εξέταση. Η υψηλή ακρίβεια καθιστά δυνατή την εργασία με οποιοδήποτε βιολογικό υγρό από το οποίο είναι δυνατή η εξαγωγή του DNA του ιού. Για να περάσετε μια εξέταση ούρων PCR, πρέπει να τηρείτε τους ακόλουθους περιορισμούς πριν πάρετε το υλικό:

• σταματήστε να κάνετε σεξ τουλάχιστον 1 ημέρα πριν από τη διαδικασία.
• 3 εβδομάδες πριν από τον τοκετό, πρέπει να ολοκληρωθεί οποιαδήποτε αντιβακτηριακή θεραπεία, γιατί τα φάρμακα θα λερώσουν την εικόνα.
• πρέπει να κάνετε την ανάλυση με άδειο στομάχι (το υγρό απαγορεύεται επίσης).
• πρέπει να πάρετε την πρώτη πρωινή δόση του υλικού.

Αποτελέσματα δοκιμής PCR

Από τα παραπάνω, είναι σαφές τι είναι η ανάλυση PCR και είναι ορατά σαφή πλεονεκτήματα αυτής της ερευνητικής μεθόδου. Ένα άλλο πλεονέκτημα αυτής της διαγνωστικής διαδικασίας είναι η ευκολία αποκωδικοποίησης των αποτελεσμάτων. Λαμβάνοντας υπόψη πόσο γίνεται η ανάλυση PCR (η ίδια η διαδικασία διαρκεί περίπου 5 ώρες, αλλά το εργαστήριο παρέχει δεδομένα μετά από 1-2 ημέρες), αυτή η διαγνωστική μέθοδος γίνεται η καλύτερη επιλογή για τον εντοπισμό πολλών λοιμώξεων. Με βάση τα αποτελέσματα, ο γιατρός σας μπορεί να σας πει ότι η εξέταση:

1. Αρνητικό - το υλικό που μελετήθηκε δεν περιείχε το επιθυμητό παθογόνο.
2. Θετικό - Βρέθηκαν RNA και DNA του παθογόνου.

Μερικές φορές οι μικροοργανισμοί ποσοτικοποιούνται. Αυτό είναι απαραίτητο για ασθένειες που προκαλούν ευκαιριακά παθογόνα. Η ιδιαιτερότητα αυτών των ιών είναι ότι εμφανίζονται μόνο όταν είναι σε περίσσεια και είναι εξαιρετικά προβληματική η ανεύρεσή τους από τη συμβατική έρευνα. Αυτός ο παράγοντας είναι σημαντικός για την επιλογή θεραπευτικών τακτικών για την αποτελεσματική αντιμετώπιση ιογενών λοιμώξεων, για παράδειγμα, ηπατίτιδας, HIV.

Για 12 λοιμώξεις

Για να κατανοήσετε πλήρως τι είναι η διάγνωση PCR των λοιμώξεων και πόσο αποτελεσματική είναι, πρέπει να γνωρίζετε ότι είναι ικανή να απομονώσει έως και 12 παθογόνους παράγοντες. Το κείμενο εκτελείται μόνο σε εργαστηριακό περιβάλλον. Για την έρευνα, χρησιμοποιούνται ειδικά ένζυμα που πολλαπλασιάζουν την ποσότητα του RNA, του DNA των θραυσμάτων του ιού. Η ανάλυση PCR για 12 λοιμώξεις μπορεί να ανιχνεύσει:

• mycobacterium tuberculosis;
• κυτταρομεγαλοϊός;
• ηπατίτιδα C, G, B, A;
• έρπης 1, 2 τύποι?
• Ιός Epstein-Barr (λοιμώδης μονοπυρήνωση);
• σεξουαλικά μεταδιδόμενες λοιμώξεις, όπως τα χλαμύδια.
• λιστερίωση;
• καντιντιδική λοίμωξη?
• Ελικοβακτήριο του πυλωρού;
• μπορελίωση, εγκεφαλίτιδα που μεταδίδεται από κρότωνες.

Για την ηπατίτιδα C

Αυτή η διαγνωστική μέθοδος βοηθά στον προσδιορισμό της παρουσίας του ιού στο αίμα. Αυτό δίνει την ευκαιρία στους γιατρούς να μιλήσουν για την παρουσία ή την απουσία του. Η ανάλυση PCR για την ηπατίτιδα C είναι δύο τύπων: ποιοτική και ποσοτική. Η πρώτη επιλογή υποδηλώνει μόνο την παρουσία του και μπορεί να έχει τη διατύπωση «ανιχνεύτηκε» / «δεν ανιχνεύτηκε». Αυτός ο τύπος δοκιμής έχει ευαισθησία 10-500 IU / ml. Αυτό υποδηλώνει ότι με χαμηλή περιεκτικότητα του παθογόνου στο σώμα, η ανάλυση δεν θα ανιχνευθεί.

Η ποσοτική ανάλυση είναι πιο ακριβής και θα δείξει τη συγκέντρωση της μόλυνσης στο αίμα. Αυτός ο δείκτης ορίζεται ως "ιικό φορτίο", μετράται στην ποσότητα του ιικού RNA για έναν συγκεκριμένο όγκο αίματος. Η αποκρυπτογράφηση σε διαφορετικά εργαστήρια μπορεί να διαφέρει. Εκτός από τη μέτρηση σε IU / ml, χρησιμοποιούνται οι μονάδες μέτρησης «αντίγραφο». Μπορείτε να υπολογίσετε ξανά τα αντίγραφα σε IU χρησιμοποιώντας τον τύπο: 1 IU = 4 αντίγραφα. Εάν στην αποκωδικοποίηση η τιμή της παρουσίας του ιού υπερβαίνει τις 800.000 IU / ml (ή 800 * 103), αυτό υποδηλώνει υψηλή περιεκτικότητα σε παθογόνο.

Για τη φυματίωση

Η εξέταση πρέπει να γίνεται το πρωί. Αυτό είναι σημαντικό για να αποτρέψουμε ολόκληρο το σώμα των φλεγμάτων που έχει σχηματιστεί κατά τη διάρκεια της νύχτας να φύγει από το στομάχι. Η ανάλυση PCR για τη φυματίωση είναι εξίσου σημαντική με το ELISA, Mantoux, τομογράφο. Η εξέταση βοηθά στην ανάδειξη της παρουσίας μυκοβακτηρίων, της κατάστασης των ούρων, της ολικής ανοσοσφαιρίνης, του ESR, για τον προσδιορισμό της κατάστασης των πνευμόνων αυτή τη στιγμή. Για την ακρίβεια των αποτελεσμάτων κατά την ανάλυση της PCR, πρέπει να πραγματοποιείται σύμφωνα με τους ακόλουθους κανόνες:

1. Η σπορά πραγματοποιείται 3 φορές, αλλά η πλήρης αναρρόφηση του περιεχομένου του στομάχου πρέπει να πραγματοποιείται μόνο σε νοσοκομειακό περιβάλλον.
2. Αποκαλύπτει μυκοβακτήρια σπέρνοντας τις παρούσες μάζες στο στομάχι σε λιγότερο από το 50% των διαγνώσεων. Ακόμη και όταν επιτυγχάνονται οι βέλτιστες συνθήκες, συνιστάται αντ 'αυτού η σάρωση υπερήχων.
3. Ακόμα κι αν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, δεν μπορεί να αποκλειστεί εντελώς η πιθανότητα εμφάνισης φυματίωσης με αλλαγή στο ESR, στην ανοσοσφαιρίνη ή σε άλλους δείκτες.
4. Οι καλλιέργειες υλικών για PCR είναι λιγότερο επιρρεπείς σε παθολογικές καταστάσεις εάν λαμβάνονται ως μέρος μιας βρογχοσκοπικής εξέτασης, η οποία αποκλείει τις υποψίες για φυματίωση σε ένα παιδί.

Για τον HIV

Για πολλούς ανθρώπους, αυτή η διάγνωση θεωρείται θανατική ποινή. Για το λόγο αυτό, μετά από συχνή σεξουαλική επαφή, το άτομο γίνεται πιο προσεκτικό στα σήματα που δίνει το σώμα του (και μερικές φορές τα βγάζει). Ο πιο αξιόπιστος τρόπος για να λάβετε επιβεβαίωση ή διάψευση αυτής της ασθένειας είναι η ανάλυση PCR για τον HIV. Το τεστ μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό των παρακάτω πιθανών προβλημάτων υγείας:

1. Διάψευση / επιβεβαίωση της παρουσίας HIV κατά την οροαρνητική περίοδο.
2. Προσδιορισμός του γονότυπου του HIV-1, HIV-2.
3. Διευκρίνιση της περιγραφής της παθολογικής διαδικασίας με αμφίβολο αποτέλεσμα ανοσοστύπωσης.
4. Λοίμωξη μετά από μετάγγιση αίματος.
5. Προσδιορισμός της κατάστασης του HIV σε παιδιά που γεννήθηκαν από μητέρες που είναι φορείς της νόσου.
6. Βοηθά στην καθιέρωση παρακολούθησης του ιικού φορτίου του σώματος.

HPV

Ο ιός των θηλωμάτων μπορεί να ανιχνευθεί σε οποιοδήποτε άτομο, για μεγάλο χρονικό διάστημα μπορεί να βρίσκεται σε λανθάνουσα κατάσταση. Η ανάπτυξη προκαλεί εξασθένηση του ανοσοποιητικού συστήματος, άγχος ή συναισθηματικές εκρήξεις. Μια εξέταση HPV PCR βοηθά στον προσδιορισμό της συγκέντρωσης του ιού στο αίμα. Για το λόγο αυτό, συνιστάται η διενέργεια ποσοτικού και όχι ποιοτικού προσδιορισμού. Αυτά τα δεδομένα θα βοηθήσουν στην πρόβλεψη της πιθανότητας ανάπτυξης κακοήθους λοίμωξης.

Η μέθοδος για τη διάγνωση της παρουσίας του HPV βασίζεται στην κύρια ιδιότητα της PCR να απομονώνει το DNA του ιού από το υλικό. Λόγω της υψηλής ευαισθησίας του τεστ, θα ανιχνευθούν ακόμη και μικρές ποσότητες βακτηρίων. Η ποσοτική έρευνα ανοίγει τη δυνατότητα στους γιατρούς να προσδιορίσουν τον βαθμό επικινδυνότητας της νόσου, να κάνουν μια πρόβλεψη για το μέλλον. Αυτή η διάγνωση είναι υποχρεωτική για όλους τους άνδρες και τις γυναίκες που έχουν βρει κονδυλώματα στον εαυτό τους. Η ποσοτική ανάλυση PCR θα βοηθήσει στον προσδιορισμό του τι προκάλεσε την ανάπτυξη του HPV: μια προσωρινή μείωση της ανοσίας ή μια χρόνια ασθένεια.

Για τον έρπητα

Αυτός ο τύπος διαγνωστικών στη μικροβιολογία βοηθά στη διεξαγωγή ανάλυσης PCR για έρπητα με υψηλή ακρίβεια. Η αντιγραφή των θραυσμάτων DNA του ιού θα γίνει μόνο εάν το απαιτούμενο γονίδιο υπάρχει στο υλικό. Σε αυτή την περίπτωση, μια δοκιμή που βασίζεται στα αποτελέσματα της διεξαγωγής μπορεί να υποδείξει την παρουσία ή την απουσία του παθογόνου. Θα είναι δυνατή η ανίχνευση του ακόμη και με χαμηλή συγκέντρωση στο αίμα.

Ένα άλλο πλεονέκτημα της ανάλυσης PCR είναι ότι μπορεί να ανιχνεύσει μια ιογενή λοίμωξη από έρπη αμέσως μετά τη μόλυνση, πριν από την έναρξη των κλινικών συμπτωμάτων. Μπορείτε να προσδιορίσετε τον τύπο του έρπητα (1 ή 2), δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία για να περάσετε την ανάλυση, αλλά οι γιατροί συνιστούν πριν πάρετε αίμα να αρνηθείτε:

• τηγανητό;
• αρωματώδης;
• αλκοόλ;
• λιπαρός.

Κατα την εγκυμοσύνη

Όταν κυοφορείτε ένα παιδί, είναι πολύ σημαντικό να διεξάγετε αυτή την έρευνα για να καταγράψετε την κατάσταση της γυναίκας. Η ανάλυση PCR κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης είναι μια από τις πιο αποτελεσματικές μεθόδους για τον προσδιορισμό της παρουσίας διαφόρων ασθενειών. Είναι απαραίτητο να διεξαχθεί μια δοκιμή όχι μόνο για τον εντοπισμό παθολογιών, αλλά και για τον προσδιορισμό της πιθανότητας μόλυνσης του παιδιού στη μήτρα. Μόνο χάρη στα διαγνωστικά PCR κατέστη δυνατό να προσδιοριστεί ο βαθμός εξέλιξης, η ανάπτυξη πολλών λοιμώξεων μέσα στη μήτρα.

Παράδοση δοκιμών PCR

Εάν ενδιαφέρεστε για το πώς γίνεται η ανάλυση PCR, τότε θα πρέπει να λαμβάνεται υπόψη κάθε μεμονωμένη περίπτωση, λαμβάνοντας υπόψη τον τύπο του βιοϋλικού. Η απόξεση, το επίχρισμα ή η αιμοληψία έχει τα δικά της χαρακτηριστικά, για παράδειγμα.

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι μια μέθοδος υψηλής ακρίβειας μοριακής γενετικής διάγνωσης που σας επιτρέπει να αναγνωρίζετε διάφορες μολυσματικές και κληρονομικές ασθένειες στον άνθρωπο, τόσο στο οξύ όσο και στο χρόνιο στάδιο και πολύ πριν εκδηλωθεί η ασθένεια.

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) αναπτύχθηκε το 1983 από τον Carey Mullis (ΗΠΑ), για την οποία τιμήθηκε με το Νόμπελ Χημείας το 1993.

Η ανάλυση PCR έχει γίνει ένα είδος «χρυσού προτύπου» για τις περισσότερες λοιμώξεις. Οι περισσότεροι ειδικοί το αντιμετωπίζουν σχεδόν καθημερινά και δεν μπορούν να φανταστούν την τελική διάγνωση χωρίς αυτό. Η PCR γίνεται συχνά η μόνη αντίδραση για τον εντοπισμό ενεργών σταδίων της νόσου σε εκείνες τις στιγμές που άλλες βακτηριολογικές, ιολογικές, ανοσολογικές διαγνωστικές μέθοδοι δεν λειτουργούν.

Τα πλεονεκτήματα της διάγνωσης PCR στη σύγχρονη ιατρική:

Άμεση ανίχνευση της παρουσίας του παθογόνου (δηλαδή, μιας συγκεκριμένης περιοχής DNA ή RNA του παθογόνου) στο υπό μελέτη δείγμα.
Η υψηλή ειδικότητα σάς επιτρέπει να προσδιορίσετε ένα μοναδικό κομμάτι DNA ή RNA, χαρακτηριστικό ενός συγκεκριμένου παθογόνου, το οποίο αποκλείει την πιθανότητα ψευδών αντιδράσεων.
Η υψηλή ευαισθησία της μεθόδου PCR καθιστά δυνατή την ανίχνευση ακόμη και μεμονωμένων κυττάρων παθογόνων μικροοργανισμών (ιούς, βακτήρια). Η ευαισθησία της ανάλυσης PCR είναι 10-1000 κύτταρα στο δείγμα δοκιμής (για παράδειγμα, η ευαισθησία των ανοσολογικών και μικροσκοπικών δοκιμών είναι μόνο 103-105 κύτταρα).
Ανάπτυξη μιας καθολικής τεχνικής PCR για την ανίχνευση διαφόρων παθογόνων. Αντικείμενο για έρευνα με τη μέθοδο PCR είναι το γενετικό υλικό (DNA, RNA) του παθογόνου. Η τεχνική σάς επιτρέπει να αναγνωρίσετε πολλά παθογόνα από ένα βιολογικό δείγμα.
Αρκετά γρήγορη λήψη του αποτελέσματος της ανάλυσης. Μια πλήρης μελέτη πραγματοποιείται σε 4-4,5 ώρες, λιγότερο συχνά λίγο περισσότερο.
Δυνατότητα ανίχνευσης παθογόνων παραγόντων πριν από την έναρξη των συμπτωμάτων της νόσου (προκλινική διάγνωση) και μετά από προηγούμενη ασθένεια (αναδρομική διάγνωση). Ένα παράδειγμα προκλινικής διάγνωσης θα είναι η εξέταση κατά την περίοδο επώασης (από τη στιγμή της μόλυνσης μέχρι να παραπονεθεί ο ασθενής), καθώς και η λανθάνουσα μόλυνση (όταν δεν υπάρχουν καθόλου συμπτώματα, αλλά υπάρχουν μόνο εργαστηριακά δεδομένα - PCR, για παράδειγμα ). Ένα από τα σημαντικά σημεία της διάγνωσης PCR είναι η PCR σε αρχειακό υλικό ή βιολογικά κατάλοιπα, η οποία είναι σημαντική για την αναγνώριση ενός ατόμου ή της πατρότητας.

Επί του παρόντος, η διαγνωστική PCR βρίσκεται υπό σημαντική εξέλιξη. Η ίδια η μέθοδος βελτιώνεται, νέες ποικιλίες PCR εμφανίζονται ξανά και ξανά, νέα συστήματα δοκιμών για αυτήν την αντίδραση εισέρχονται στην ιατρική αγορά. Χάρη σε αυτό, το κόστος των μελετών PCR γίνεται πιο προσιτό για ένα ευρύ φάσμα ασθενών κάθε χρόνο.

Σε τι βασίζεται η μέθοδος PCR;

Η βάση της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης είναι ο πολλαπλός διπλασιασμός (ενίσχυση) μιας συγκεκριμένης περιοχής DNA ή RNA χρησιμοποιώντας ένζυμα στο εργαστήριο. Ως αποτέλεσμα, σχηματίζεται αυτή η ποσότητα DNA ή RNA, επαρκής για οπτική ανάλυση. Κατά τη διάρκεια της μελέτης, αντιγράφεται μόνο εκείνο το τμήμα που ταιριάζει στις δεδομένες συνθήκες και μόνο στην περίπτωση της παρουσίας του στο δείγμα δοκιμής.

Για παράδειγμα, υλικό για έρευνα, στο οποίο υποτίθεται ότι υπάρχουν θραύσματα DNA ή RNA του παθογόνου (σάλιο, αίμα, ούρα, εκκρίσεις από τα γεννητικά όργανα), τοποθετείται σε έναν ειδικό αντιδραστήρα (ενισχυτή). Περαιτέρω, προστίθενται σε αυτό συγκεκριμένα ένζυμα, τα οποία συνδέονται με το DNA ή το RNA του παθογόνου και ένα αντίγραφό του συντίθεται. Αυτή η αντιγραφή λαμβάνει χώρα σε διάφορα στάδια ανάλογα με τον τύπο της «αλυσιδωτής αντίδρασης», και τελικά εκατοντάδες και χιλιάδες αντίγραφα μπορούν να δημιουργηθούν από ένα αντίγραφο του γενετικού υλικού. Στη συνέχεια ακολουθεί η ανάλυση και σύγκριση του αποτελέσματος με τη διαθέσιμη βάση δεδομένων για τη δομή των διαφόρων παθογόνων. Μέσω της PCR, είναι δυνατό όχι μόνο να προσδιοριστεί ο τύπος του παθογόνου, αλλά και να δοθεί ένα ποσοτικό αποτέλεσμα της ανάλυσης, δηλαδή πόσα παθογόνα υπάρχουν στο ανθρώπινο σώμα.

Η μέθοδος PCR επεκτείνει επί του παρόντος το φάσμα των ευκαιριών έρευνας: την εισαγωγή μεταλλάξεων, το μάτισμα θραυσμάτων DNA και έχει γίνει ευρέως διαδεδομένη στην ιατρική, για παράδειγμα, για τη διαπίστωση της πατρότητας, την εμφάνιση νέων γονιδίων κ.λπ.

Ποιες λοιμώξεις μπορούν να ανιχνευθούν χρησιμοποιώντας διαγνωστικά PCR

1) Λοίμωξη HIV (ο ιός της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας HIV-1 μπορεί να ανιχνευθεί)
2) Ιογενής ηπατίτιδα A, B, C, G (RNA-HAV, DNA-HBV, RNA-HCV, RNA-HGV)
3) Λοιμώδης μονοπυρήνωση (DNA του ιού Epstein-Barr-EBV)
4) Λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊό (DNA-CMV)
5) Λοίμωξη από έρπητα (DNA - ιός απλού έρπητα τύπους 1 και 2 HSV)
6) ΣΜΝ (σεξουαλικά μεταδιδόμενες λοιμώξεις) - ουρεαπλάσμωση, γαρδνερέλλωση, χλαμύδια, μυκοπλάσμωση, τριχομονίαση,
7) Φυματίωση (Mycobacterium tuberculosis)
8) Ογκογόνοι ιοί - λοίμωξη από τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων (ιός των ανθρώπινων θηλωμάτων (συμπεριλαμβανομένων των ογκογόνων τύπων του 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58 και 59)
9) Βορελίωση, εγκεφαλίτιδα που μεταδίδεται από κρότωνες
10) Λιστερίωση
11) Καντιντίαση (μύκητες του γένους Candida)
12) Λοίμωξη από ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού
άλλα

Δεδομένου του φάσματος των παθογόνων, η διάγνωση PCR χρησιμοποιείται ενεργά στη γυναικολογική, ουρολογική πρακτική, στην πρακτική ενός ειδικού λοιμωξιολογίας, στην πνευμονολογία, τη φθισιολογία, τη γαστρεντερολογία, την αιματολογία, την ογκολογία και άλλα.

Υλικό για έρευνα και κανόνες συλλογής του

Το υλικό για την έρευνα PCR, στο οποίο είναι δυνατός ο εντοπισμός ξένου DNA βακτηρίων ή DNA ή RNA ενός ιού, μπορεί να είναι διάφορα βιολογικά μέσα και ανθρώπινα υγρά: βλέννα, ούρα, αίμα, πτύελα, απόξεση επιθηλιακών κυττάρων, ιστοί πλακούντα, αίμα, χυμός προστάτη, αμνιακό υγρό, υπεζωκοτικό υγρό.

Κατά την εξέταση για σεξουαλικά μεταδιδόμενες λοιμώξεις (ΣΜΝ), εκκρίσεις από τα γεννητικά όργανα, επίχρισμα ή απόξεση από τον τράχηλο, επίχρισμα ή απόξεση από την ουρήθρα (ουρήθρα), λαμβάνονται ούρα από άνδρες και γυναίκες.

Κατά τον έλεγχο για λοιμώξεις (λοιμώξεις από έρπητα, CMVI, μονοπυρήνωση, τοξοπλάσμωση, ηπατίτιδα B, C, λοίμωξη HIV), λαμβάνεται αίμα για PCR.

Για τη διάγνωση λοιμώδους μονοπυρήνωσης, CMVI, λοίμωξης από έρπη, λαμβάνεται ένα στυλεό από το λαιμό και λαμβάνονται ούρα για εξέταση για CMVI. Συχνά, για εξέταση για βλάβη στο νευρικό σύστημα, σε διάφορες μελέτες, λαμβάνεται εγκεφαλονωτιαίο υγρό.

Στην πνευμονολογία το υλικό είναι τα πτύελα, το υπεζωκοτικό υγρό.

Κατά την εξέταση για ενδομήτριες λοιμώξεις - αμνιακό υγρό, ιστός πλακούντα.

Προετοιμασία για την παράδοση υλικού και διαγνωστικά PCR

Σχεδόν όλοι οι ασθενείς που υποβάλλονται σε διαγνωστική PCR έχουν το δικαίωμα να βασίζονται σε ένα αξιόπιστο, ακριβές και γρήγορο αποτέλεσμα, το οποίο εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τις δυνατότητες του εργαστηρίου και τον επαγγελματισμό του βοηθού εργαστηρίου. Ταυτόχρονα, πολλοί δεν πιστεύουν ότι αυτή η ίδια η αξιοπιστία εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από εμάς τους ίδιους, δηλαδή από τις συστάσεις του θεράποντος ιατρού, τον τρόπο ζωής και την ορθότητα της δειγματοληψίας του υλικού. Κατά τη δειγματοληψία υλικού, απαιτούνται συνθήκες που αποκλείουν τη μόλυνση (μόλυνση) του υλικού και, κατά συνέπεια, θέτουν υπό αμφισβήτηση την αντικειμενικότητα της ανάλυσης.

Η σωστή προετοιμασία για την παράδοση του υλικού δεν είναι ιδιαίτερα δύσκολη. Υπάρχουν οι ακόλουθες συστάσεις των γιατρών για τους ασθενείς:

1) να μην ζείτε σεξουαλικά την ημέρα πριν από την παράδοση του υλικού.
2) αίμα για έρευνα δίνεται το πρωί με άδειο στομάχι (μην τρώτε, μην πίνετε).
3) όταν δίνετε ούρα, η πρώτη πρωινή δόση συλλέγεται σε καθαρό, αποστειρωμένο δοχείο.

Ο χρόνος ετοιμότητας της ανάλυσης PCR

Το τελικό αποτέλεσμα είναι έτοιμο σε 1,5-2 ημέρες μετά την παράδοση του υλικού. Σε ορισμένες περιπτώσεις, το αποτέλεσμα είναι έτοιμο την πρώτη κιόλας μέρα.

Αποκωδικοποίηση αποτελεσμάτων PCR

ΑρνητικόςΤο αποτέλεσμα της PCR δείχνει ότι δεν βρέθηκαν ίχνη μολυσματικών παραγόντων στο υλικό δοκιμής τη στιγμή της παράδοσης. Οι περισσότερες περιπτώσεις δείχνουν την απουσία της λοίμωξης που δοκιμάστηκε να εντοπιστεί στο δείγμα δοκιμής.

Θετικόςτο αποτέλεσμα της PCR υποδεικνύει την ανίχνευση ιχνών μόλυνσης στο βιολογικό δείγμα υπό μελέτη. Με μεγάλη ακρίβεια, ένα θετικό αποτέλεσμα υποδηλώνει την παρουσία μόλυνσης σε μια δεδομένη στιγμή.

Υπάρχουν περιπτώσεις όπου η PCR είναι θετική, αλλά είναι αδύνατο να μιλήσουμε για ενεργή λοίμωξη - αυτή είναι η λεγόμενη "υγιή μεταφορά" χωρίς κλινικά συμπτώματα της νόσου, η οποία δεν απαιτεί θεραπεία, αλλά απαιτεί δυναμική παρατήρηση από γιατρό. Παρατηρείται συχνότερα σε πλήθος ιογενών λοιμώξεων (HPV, CMVI, EBV λοίμωξη, λοίμωξη από έρπη και άλλες) σε υλικά όπως το σάλιο, η απόξεση του τραχηλικού πόρου, η ουρήθρα, δηλαδή από τοπική εστία. Ωστόσο, δεν πρέπει να ξεχνάμε ότι είναι δυνατή η μετάδοση της μόλυνσης από φορείς σε υγιή άτομα, καθώς και η μετάβαση σε μια χρόνια μορφή της νόσου με την ενεργοποίηση της διαδικασίας είναι δυνατή. Εάν η PCR είναι θετική στο αίμα, τότε αυτό δεν είναι πλέον φορέας και απαιτεί ειδική θεραπεία.

Το ποσοτικό αποτέλεσμα της PCR αξιολογείται μόνο από τον γιατρό ξεχωριστά για μια συγκεκριμένη λοίμωξη ξεχωριστά και δεν έχει γενικές διαβαθμίσεις. Με βάση το ποσοτικό αποτέλεσμα PCR, ο γιατρός μπορεί να καθορίσει τον βαθμό της δραστηριότητας της μόλυνσης και να ορίσει το στάδιο της νόσου, το οποίο σίγουρα θα επηρεάσει την πορεία και τις δόσεις των συνταγογραφούμενων φαρμάκων.

Ένα από τα τελευταία ανησυχητικά ερωτήματα: πόσο ακριβή είναι τα διαγνωστικά PCR;

Υπάρχουν 3 ορισμοί για την ανάλυση PCR:

1. Ακρίβεια (με υψηλό βαθμό πιθανότητας, είναι δυνατή η ανίχνευση ή απουσία μόλυνσης).
2. Ειδικότητα (ακρίβεια ανίχνευσης συγκεκριμένης μόλυνσης).
3. Ευαισθησία (ακόμα και με χαμηλή περιεκτικότητα σε γενετικό υλικό παθογόνων στο δείγμα δοκιμής, η μόλυνση θα ανιχνευθεί).

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης πρακτικά δεν δίνει ψευδώς θετικά αποτελέσματα (δηλαδή δεν υπάρχουν θετικά δείγματα όπου δεν υπάρχει μόλυνση). Τα ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα είναι σπάνια (πιο συχνά αυτό οφείλεται στην απουσία ενεργού λοίμωξης σε ένα άτομο αυτή τη στιγμή). Για παράδειγμα, λανθάνουσα μόλυνση, χρόνια λοίμωξη χωρίς δραστηριότητα.

Λοιμωξιολόγος N.I. Bykova

Βίντεο σχετικά με το γιατί και πώς να κάνετε μια εξέταση PCR για λοιμώξεις

Η PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) είναι ένα επίτευγμα της μοριακής βιολογίας, μία από τις κύριες μεθόδους κλινικής εργαστηριακής διάγνωσης του τέλους του 20ού και των αρχών του 21ου αιώνα, φέρνοντας τεράστια οφέλη σε διάφορους τομείς της ιατρικής επιστήμης.

Έτσι, ακόμα κι αν ο ίδιος ο ζωντανός ιός δεν χαθεί ανάμεσα στα εκατομμύρια κύτταρα του ανθρώπινου σώματος, αλλά μόνο ένα σωματίδιο του DNA του, τότε η PCR, αν τίποτα δεν παρεμβαίνει σε αυτήν, πιθανότατα θα αντεπεξέλθει στην εργασία και θα αναφέρει την παρουσία ενός «ξένος» με θετικό αποτέλεσμα. Αυτή είναι η ουσία της PCR και το κύριο πλεονέκτημά της.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα

Οι υψηλότερες απαιτήσεις επιβάλλονται στο εργαστήριο που εκτελεί διαγνωστικά PCR όσον αφορά τον εξοπλισμό, τα συστήματα δοκιμών και τα προσόντα του ιατρικού προσωπικού. Πρόκειται για ένα εργαστήριο υψηλής τεχνολογίας με ένα οπλοστάσιο αντιδραστηρίων υψηλής ευαισθησίας και εξαιρετικά ειδικών, επομένως δεν έχει ιδιαίτερα μειονεκτήματα. Είναι κάτι που δίνει θετικό αποτέλεσμα ελλείψει κλινικών εκδηλώσεων και έτσι θέτει τον γιατρό μπροστά σε ένα δίλημμα: αξίζει να ξεκινήσει η θεραπεία ή όχι;

Ο γιατρός που παρατηρεί τον ασθενή αρχίζει να αμφιβάλλει για την αξιοπιστία των αποτελεσμάτων των εξετάσεων, αφού δεν βλέπει κανένα σημάδι της νόσου. Ωστόσο, δεδομένης της υψηλής ευαισθησίας του συστήματος PCR, θα πρέπει να θυμόμαστε ότι ανιχνεύει το παθογόνο ακόμη και στο προκλινικό στάδιο και ένα θετικό αποτέλεσμα σε αυτή την περίπτωση είναι περισσότερο πλεονέκτημα παρά μειονέκτημα. Με βάση αυτό, ο θεράπων ιατρός πρέπει να αποφασίσει ο ίδιος για την καταλληλότητα της θεραπείας, λαμβάνοντας υπόψη άλλα επιχειρήματα "υπέρ" και "κατά".

Τα πλεονεκτήματα της διάγνωσης χρησιμοποιώντας αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι προφανή:

• Υψηλή ειδικότηταφτάνοντας το 100%, λόγω της παρουσίας στο επιλεγμένο δείγμα σωματιδίων νουκλεϊκών οξέων εγγενών σε έναν συγκεκριμένο οργανισμό, αλλά ξένων για τον άνθρωπο.
• Υψηλή απόδοση, επειδή η PCR είναι μια αυτοματοποιημένη τεχνική υψηλής τεχνολογίας που καθιστά δυνατή τη διεξαγωγή δοκιμών την ημέρα της δειγματοληψίας και έτσι απαλλάσσει τον ασθενή από περιττές ανησυχίες.
• Η PCR, δουλεύοντας σε ένα δείγμα, είναι σε θέση να πραγματοποιήσει πολλές μελέτες και περίπου βρείτε πολλαπλά παθογόνααν έχει τέτοιο καθήκον. Για παράδειγμα, κατά τη διάγνωση της χλαμυδιακής λοίμωξης, όπου η PCR είναι μία από τις κύριες μεθόδους, μαζί με τα χλαμύδια, μπορεί επίσης να ανιχνευθεί η νεισερία (γονόκοκκος), ο αιτιολογικός παράγοντας. Επιπλέον, αυτό δεν επηρεάζει αρνητικά την αξιοπιστία των αποτελεσμάτων.
• σας κάνει τεστ PCR είναι επικίνδυνοι μικροοργανισμοί στην περίοδο επώασης, όταν δεν έχουν ακόμη καταφέρει να προκαλέσουν απτή βλάβη στο σώμα, δηλαδή, η έγκαιρη διάγνωση προειδοποιεί για τη μελλοντική εξέλιξη της παθολογικής διαδικασίας, η οποία καθιστά δυνατή την προετοιμασία για αυτήν και την πλήρη όπλιση.

Επιπλέον, για να αποφευχθούν παρεξηγήσεις που προκύπτουν μερικές φορές κατά τη διάρκεια της διάγνωσης, η PCR προστατεύεται επίσης από το γεγονός ότι τα αποτελέσματά της μπορούν να καταγραφούν (φωτογραφία, υπολογιστής) προκειμένου να τα χρησιμοποιήσει για ειδικούς σκοπούς, εάν είναι απαραίτητο.

Ένα αρνητικό αποτέλεσμα θεωρείται φυσιολογικό στις αποκρίσεις PCR.υποδεικνύοντας την απουσία θραυσμάτων ξένων νουκλεϊκών οξέων, μια θετική απόκριση θα υποδεικνύει την παρουσία μόλυνσης στο σώμα, οι ψηφιακές τιμές σημαίνουν την κατάσταση του ιού και τη συγκέντρωσή του κατά τη στιγμή της δοκιμής. Ωστόσο, η πλήρης αποκωδικοποίηση της ανάλυσης πραγματοποιείται από γιατρό που έχει ολοκληρώσει ειδική εκπαίδευση στο θέμα της «PCR». Το να προσπαθείτε να ερμηνεύσετε τα αποτελέσματα μόνοι σας δεν έχει κανένα νόημα, αφού είναι πιθανό, κάτι που είναι πιθανό να συμβεί, να παρεξηγήσετε και να αρχίσετε να ανησυχείτε εκ των προτέρων.

Τι «φοβάται» η PCR, τι μπορεί να κάνει και πώς να προετοιμαστεί για αυτό;

Όπως σε κάθε άλλη έρευνα, Μερικές φορές τα αποτελέσματα των δοκιμών αποδεικνύονται ψευδώς θετικά ή ψευδώς αρνητικάόπου η PCR δεν αποτελεί εξαίρεση. Αυτό μπορεί να συμβεί στις ακόλουθες περιπτώσεις:

1. Παραβιάσεις της τεχνολογικής διαδικασίας σε ένα από τα στάδια της αντίδρασης.
2. Μη συμμόρφωση με τους κανόνες για τη συλλογή, την αποθήκευση ή τη μεταφορά του υλικού.
3. Η παρουσία ακαθαρσιών στο υλικό.

Αυτό υποδηλώνει ότι η διάγνωση λοιμώξεων με PCR πρέπει να προσεγγίζεται προσεκτικά, προσεκτικά και με ακρίβεια, διαφορετικά τα δείγματα του υλικού μπορεί να αλλάξουν τη δομική τους δομή ή να καταρρεύσουν εντελώς.

Στάδια διάγνωσης PCR. Τα ψευδή αποτελέσματα μπορεί να δώσουν παραβιάσεις σε οποιοδήποτε στάδιο της μελέτης.

Η διάγνωση λοιμώξεων με PCR ανήκει στην κατηγορία των "χρυσών προτύπων" μεταξύ άλλων εργαστηριακών μεθόδων, επομένως μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αναζήτηση αιτιολογικών παραγόντων πολλών ασθενειών που, με την πρώτη ματιά, δεν έχουν τίποτα κοινό:

• Φυματίωση διαφόρων εντοπισμών, πνευμονία (συμπεριλαμβανομένης της άτυπης, που προκαλείται από χλαμύδια).
• Παιδικές λοιμώξεις (ιλαρά, ερυθρά, παρωτίτιδα, ιλαρά).
• Διφθερίτιδα;
• Σαλμονέλωση;
• Ζωονοσογόνος λοιμώδης νόσος - λιστερίωση (η ασθένεια χαρακτηρίζεται από μια ποικιλία συμπτωμάτων με βλάβη στους λεμφαδένες, το κεντρικό νευρικό σύστημα, τα εσωτερικά όργανα).
• Ασθένειες που προκαλούνται από τη διείσδυση του ιού Epstein-Barr (λοιμώδης μονοπυρήνωση κ.λπ.).
• Ογκολογική παθολογία που προκαλείται από λοίμωξη από ιό θηλώματος (HPV και οι τύποι του).
• Βορρελίωση (νόσος του Lyme, εγκεφαλίτιδα που μεταδίδεται από κρότωνες).
• Λοίμωξη από ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού, ο αιτιολογικός παράγοντας της οποίας είναι το μικρόβιο Helicobacter pylori που ζει στο ανθρώπινο στομάχι. Έχει αποδειχθεί ότι το ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού προκαλεί την ανάπτυξη καρκίνου του στομάχου ή του δωδεκαδακτύλου.
• και σχεδόν τα πάντα.

Η διάγνωση PCR σεξουαλικά μεταδιδόμενων λοιμώξεων έχει ιδιαίτερη σημασία, καθώς οι ασθένειες που προκαλούνται με αυτόν τον τρόπο συχνά προχωρούν για μεγάλο χρονικό διάστημα χωρίς κλινικές εκδηλώσεις, αλλά κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης αρχίζουν να εντείνονται και, ως εκ τούτου, απειλούν την υγεία, ακόμη και τη ζωή του παιδιού. . Συμπεριφέρονται παρόμοια και. Ορισμένα από αυτά («κολλώδη») αναφέρονται επίσης σε ΣΜΝ, επομένως τα τελευταία απαιτούν πιο λεπτομερή εξέταση. Ο αναγνώστης θα μπορέσει να εξοικειωθεί με τις πιο δημοφιλείς τεχνικές στις επόμενες ενότητες του άρθρου.

Πώς να προετοιμαστείτε σωστά για να έχετε ένα αξιόπιστο αποτέλεσμα;

Αμέσως σημειώνουμε ότι η προετοιμασία για PCR είναι αρκετά απλή και δεν απαιτεί ιδιαίτερη προσπάθεια από την πλευρά του ασθενούς. Απλά πρέπει να ολοκληρώσετε τρεις απλές εργασίες:

1. Να μην έχετε σεξουαλική επαφή 24 ώρες πριν κάνετε το τεστ.
2. Για να πάρετε και να αναλύσετε αίμα από μια φλέβα, πρέπει να έρθετε με άδειο στομάχι, παρεμπιπτόντως, δεν μπορείτε να πιείτε ούτε.
3. Θα πρέπει να δωρίσετε ούρα τη νύχτα (το πρωί - σε ένα αποστειρωμένο βάζο, που αγοράσατε την προηγούμενη μέρα στο φαρμακείο).

Η PCR μπορεί να λειτουργήσει σε οποιοδήποτε βιολογικό περιβάλλον

Η μέθοδος PCR δεν διαφέρει "αιμοδιψία", επομένως, δέχεται οποιοδήποτε βιολογικό περιβάλλον που περιέχει τον υποτιθέμενο μολυσματικό παράγοντα. η επιλογή - τι πρέπει να ληφθεί για έρευνα, παραμένει στον γιατρό.

Έτσι, σε αναζήτηση παθογόνου, εκτός από μια εξέταση αίματος (αν και είναι επίσης κατάλληλη και στις περισσότερες περιπτώσεις λαμβάνεται παράλληλα με άλλο υλικό), μπορείτε να χρησιμοποιήσετε:

• (έκκριση του ουρογεννητικού συστήματος).
• Απόξεση των βλεννογόνων της στοματικής κοιλότητας, του επιπεφυκότα, του ρινοφάρυγγα, της γεννητικής οδού (στις γυναίκες λαμβάνονται από τον τράχηλο και τον κόλπο, στους άνδρες - από την ουρήθρα).
• Σάλιο;
• Σπέρμα;
• Χυμός προστάτη?
• Πλακουντικός ιστός και αμνιακό υγρό (αμνιακό υγρό).
• Ιζήματα ούρων (μετά από φυγοκέντρηση), για παράδειγμα, για την ανίχνευση ορισμένων ΣΜΝ και Mycobacterium tuberculosis.
• Πτύελα και υπεζωκοτικό υγρό για τον ίδιο σκοπό.
• Εξιδρώματα;
• Εγκεφαλονωτιαίο υγρό σε περίπτωση υποψίας λοιμώδους βλάβης του κεντρικού νευρικού συστήματος.
• Υλικό βιοψίας (βιοψία) που λαμβάνεται από το ήπαρ, το δωδεκαδάκτυλο, το στομάχι κ.λπ.

Στα παραπάνω, θα ήθελα να προσθέσω ότι θα υπάρχει αρκετό υλικό για έλεγχο σε όλες τις περιπτώσεις, ακόμη και σε ξύσεις και εκκρίσεις, καθώς η δοκιμή PCR δεν απαιτεί μεγάλους όγκους, μερικά μικρολίτρα αρκούν για ανάλυση, τα οποία συνήθως λαμβάνονται σε Μικροσωλήνας Eppendorf και στάλθηκε για μελέτη.

Ασθένειες και χρήση PCR

HIV και αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης

Συνήθως, όταν περάσετε μια ανώνυμη εξέταση σε περίπτωση θετικών αποτελεσμάτων ανοσοστύπωσης, η διάγνωση επαναλαμβάνεται ξανά. Εάν η διάγνωση επιβεβαιωθεί, ο ασθενής συνταγογραφείται πρόσθετες μελέτες:

1. Προσδιορισμός μέσω ανοσολογικών αντιδράσεων των απόλυτων τιμών του αριθμού των λεμφοκυττάρων CD 4 (ανοσοεπαρκή κύτταρα - Τ-βοηθητικά ή βοηθητικά κύτταρα), τα οποία μολύνει η λοίμωξη στην πρώτη θέση, μετά τα οποία χάνουν τις βασικές τους ιδιότητες και δεν μπορούν να διακρίνουν μεταξύ τους «δικοί μας» και άλλοι». Εκλαμβάνουν το RNA του ιού που κυκλοφορεί στο πλάσμα του αίματος ως φυσιολογικά κύτταρα του σώματος και δεν αντιδρούν σε αυτά.
2. Ανίχνευση ιικού RNA με PCR και υπολογισμός της συγκέντρωσης των ιικών σωματιδίων προκειμένου να καθοριστεί το στάδιο, η σοβαρότητα της παθολογικής διαδικασίας και η πρόγνωση, λαμβάνοντας υπόψη αυτά τα δεδομένα... Φυσικά, η λέξη "κανόνας" δεν υπάρχει από αυτή την άποψη, καθώς η αντίδραση είναι πάντα θετική και η αποκωδικοποίηση των ψηφιακών τιμών είναι στην αρμοδιότητα του γιατρού.

PCR και ηπατίτιδα

Η μέθοδος PCR μπορεί να ανιχνεύσει παθογόνα, πιο συχνά η εξέταση χρησιμοποιείται για τη διάγνωση της ηπατίτιδας C, η οποία προσδιορίζεται ελάχιστα από άλλες μεθόδους.

Ο ιός της ηπατίτιδας C (που περιέχει RNA) στη συμπεριφορά του στο ανθρώπινο σώμα μοιάζει με τον ιό HIV. Σφηνώνοντας στο γονιδίωμα των ηπατικών κυττάρων (ηπατοκύτταρα), μένει εκεί περιμένοντας τον χρόνο του, ο οποίος μπορεί να έρθει ακόμη και σε 2 χρόνια, ακόμα και σε 20 χρόνια, έτσι οι γιατροί τον αποκάλεσαν «στοργικό δολοφόνο». Η ηπατίτιδα C οδηγεί στο σχηματισμό μιας κακοήθους διαδικασίας στο ηπατικό παρέγχυμα, η οποία εκδηλώνεται στα μεταγενέστερα στάδια. Το ανοσοποιητικό σύστημα δεν παρατηρεί όλα αυτά τα συμβάντα, παρερμηνεύοντας τον ιό με το ηπατοκύτταρο. Είναι αλήθεια ότι τα αντισώματα κατά του ιού παράγονται σε ορισμένες ποσότητες, αλλά δεν παρέχουν μια αξιοπρεπή ανοσολογική απόκριση. Για τη διάγνωση, η ELISA για την ηπατίτιδα C δεν είναι πολύ κατατοπιστική, καθώς δείχνει ότι ο ιός έχει αφήσει ίχνη και αν έφυγε από μόνος του είναι άγνωστο. Περιπτώσεις αυτοθεραπείας είναι γνωστές στον HCV, ενώ τα αντισώματα κατά του ιού παραμένουν και συνεχίζουν να κυκλοφορούν εφ' όρου ζωής (ανοσολογική μνήμη). Η PCR ξεπερνά αισθητά το σχηματισμό αντισωμάτων και μπορεί να ανιχνεύσει ένα ιικό σωματίδιο ήδη μετά από 1-1,5 εβδομάδες, ενώ τα αντισώματα μπορούν να εμφανιστούν σε διάστημα από 2 μήνες έως έξι μήνες

Η διάγνωση PCR σε περίπτωση υποψίας αχαλίνωτου ιού ηπατίτιδας C στο ανθρώπινο σώμα είναι η βέλτιστη μέθοδος έρευνας, επειδή μόνο αυτή μπορεί να αναγνωρίσει την παρουσία ενός «στοργικού εχθρού» στο αίμα ή τη βιοψία ήπατος του ασθενούς.

Ωστόσο, μερικές φορές υπάρχουν περιπτώσεις που τα αντισώματα είναι θετικά, και το αποτέλεσμα της PCR είναι αρνητικό. Αυτό συμβαίνει μερικές φορές όταν η ποσότητα του ιού είναι πολύ χαμηλή ή όταν είναι «αδρανής» στο συκώτι χωρίς να εισέλθει στην κυκλοφορία του αίματος. Προκειμένου να βρεθεί ακόμα η αλήθεια, λαμβάνεται μια επαναλαμβανόμενη ανάλυση από τον ασθενή, ή ακόμα και περισσότερες από μία.

Λοίμωξη από τον ιό των ανθρωπίνων θηλωμάτων

Εάν δεν συμβεί αυτοίαση, μπορεί επίσης, χωρίς να εμφανιστεί, να επιμείνει για μεγάλο χρονικό διάστημα στο σώμα του ξενιστή, ο οποίος δεν το υποπτεύεται καν, καθώς δεν έχει γίνει ποτέ PCR και δεν υπήρχαν συμπτώματα της νόσου. . Ωστόσο, η παρουσία λοίμωξης από τον ιό των θηλωμάτων, αν και λανθάνουσα, απέχει πολύ από το να είναι αδιάφορη για την ανθρώπινη υγεία, όπου ορισμένοι τύποι ιών που προκαλούν καρκίνο (τύποι 16, 18) είναι ιδιαίτερα επικίνδυνοι.

Συχνότερα, το γυναικείο μισό του πληθυσμού πάσχει από HPV, καθώς ο ιός αγαπά περισσότερο τη γυναικεία γεννητική περιοχή και ιδιαίτερα τον τράχηλο, όπου ορισμένοι τύποι ιών συμβάλλουν στην ανάπτυξη δυσπλαστικών διεργασιών και στη συνέχεια καρκίνου του τραχήλου της μήτρας, εάν δεν υπάρχει δυσπλασία. αντιμετωπιστεί και ο ιός ελευθερώνεται. Έτσι, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης θα ανιχνεύσει το DNA του ιού και στη συνέχεια θα υποδείξει τον «κακό» ή τον «καλό» (ογκογόνο ή μη ογκογόνο) τύπο που έχει εγκατασταθεί στο σώμα της γυναίκας.

Άλλα ΣΜΝ και λοιμώξεις TORCH

Προφανώς, η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης μπορεί να βρει οποιαδήποτε ξένη δομή που αποτελείται από νουκλεϊκά οξέα, επομένως αυτή η δοκιμή είναι κατάλληλη για την ανίχνευση όλων των ΣΜΝ και λοιμώξεων TORCH, ωστόσο, δεν χρησιμοποιείται πάντα. Γιατί, ας πούμε, να διεξάγουμε τόσο ακριβές μελέτες για τον εντοπισμό ή τον γονόκοκκο, αν υπάρχουν πιο προσιτές και φθηνότερες;

Οι λοιμώξεις TORCH και τα ΣΜΝ είναι τόσο αλληλένδετα που μερικές φορές είναι δύσκολο να προσδιοριστεί σε ποια ομάδα πρέπει να αποδοθεί ένα συγκεκριμένο παθογόνο. Γενικά, μπορεί να είναι δύσκολο να τα καταλάβουμε, καθώς πρόκειται για αρκετά διαφορετικές ομάδες μικροοργανισμών που μπορούν να μεταδοθούν σεξουαλικά πάντα ή μόνο υπό ορισμένες συνθήκες (ανοσοανεπάρκεια) και μπορεί να ενδιαφέρουν μόνο κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, λόγω της πιθανής αρνητικής επίδρασης στην την πορεία του και στο έμβρυο.

Η PCR είναι η κύρια μέθοδος για την ανίχνευση κρυφών λοιμώξεων

Η ανάπτυξη κλινικών εκδηλώσεων βασίζεται σε διαφορετικά παθογόνα, τα οποία μπορούν να βρεθούν μόνο με PCR, που είναι το κύριο καθήκον της μερικές φορές μαζί με την ELISA και μερικές φορές ως η μόνη επιβεβαιωτική εξέταση, ειδικά εάν δεν υπάρχουν συμπτώματα της νόσου.Μια τέτοια δύσκολη κατάσταση μπορεί να δημιουργήσει μια πολυμικροβιακή λοίμωξη, η οποία εκτός από εμφανή παθογόνα περιλαμβάνει και ευκαιριακά παθογόνα.

Το ουρεόπλασμα θεωρείται συχνά σε συνδυασμό με μυκόπλασμα.Και αυτό δεν είναι τυχαίο. Αυτά τα είδη, όπως τα χλαμύδια, δεν ταξινομούνται ως ιοί ή βακτήρια, ζουν μέσα στα κύτταρα και ανήκουν σε ΣΜΝ, αν και η παρουσία τους σε ένα υγιές σώμα δεν είναι επίσης ασυνήθιστη. Έτσι, για να διακρίνουμε έναν υγιή φορέα από έναν άρρωστο, χρειάζονται ειδικές μέθοδοι, όπου η PCR θεωρείται η πιο αξιόπιστη, καθώς, λόγω των ιδιαιτεροτήτων της δομής και της συμπεριφοράς αυτών των μικροοργανισμών, άλλες μελέτες είναι αναποτελεσματικές.

Όσον αφορά τον (τύπος 1, 2) και, που επίσης ανήκει στους ιούς του έρπητα (τύπος 5), η κατάσταση είναι επίσης διφορούμενη. Το ποσοστό μόλυνσης του παγκόσμιου πληθυσμού πλησιάζει το 100%, επομένως, σε αυτήν την περίπτωση, η αναγνώριση του ιού και της δόσης του είναι πολύ σημαντική, η οποία παίζει ρόλο ιδιαίτερα στην εγκυμοσύνη, γιατί για έναν ενήλικα, ένας ιός που έχει ριζώσει στην το σώμα συχνά δεν προκαλεί κανένα πρόβλημα και δεν δίνει σημάδια της νόσου.

Επομένως, μια τέτοια εξέταση που συνταγογραφείται από γιατρό δεν πρέπει να αγνοηθεί, επειδή σε ορισμένες περιπτώσεις η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι μια υποχρεωτική και απαραίτητη μέθοδος εργαστηριακής διάγνωσης που μπορεί να προστατεύσει όχι μόνο μια γυναίκα, αλλά και έναν μικρό, αγέννητο άνδρα από σοβαρές επιπλοκές.

Εν κατακλείδι, θα ήθελα να σημειώσω ότι μια τόσο υπέροχη μέθοδος όπως η PCR υπηρετεί την ανθρωπότητα για περισσότερα από 30 χρόνια. Ταυτόχρονα, τα καθήκοντα του τεστ δεν περιορίζονται στην αναζήτηση παθογόνων μολυσματικών ασθενειών. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, που γεννήθηκε με βάση τη μοριακή βιολογία, είναι άρρηκτα συνδεδεμένη με τη γενετική. χρησιμοποιείται επιτυχώς στην εγκληματολογική επιστήμη για προσωπική ταυτοποίηση, στην ιατροδικαστική για τη διαπίστωση της πατρότητας, στην κτηνιατρική, εάν η κλινική ζώων έχει τη δυνατότητα αγοράς ακριβού εξοπλισμού, καθώς και σε άλλους τομείς (βιομηχανία, γεωργία κ.λπ.).

Βίντεο: PCR - η ουσία και η εφαρμογή