PCR 12 come viene eseguita l'analisi. Diagnostica PCR. Che cos'è, dove si applica, come prenderlo, decodifica delle analisi. Quali infezioni vengono rilevate dalla diagnostica PCR?

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un moderno strumento diagnostico per una varietà di infezioni con elevata precisione. L'analisi PCR consente di determinare gli agenti causali delle malattie infettive, in base al loro materiale genetico (RNA o DNA). Il materiale biologico per la ricerca può essere sangue, una macchia di genitali, saliva e così via.

CONSULTAZIONE SUI RISULTATI DELL'ANALISI o degli ultrasuoni - 500 rubli.

Il metodo PCR è stato scoperto nel 1983. Il suo creatore è Carey Mullis (USA), per questa scoperta ha ricevuto il Premio Nobel per la Chimica. Già nei primi dieci anni, la tecnica è diventata uno studio di laboratorio obbligatorio in tutto il mondo, avendo ricevuto riconoscimenti da scienziati e medici.

Diana Medical Center offre di condurre uno studio utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi nel più breve tempo possibile e con il più alto livello di accuratezza. La nostra base diagnostica soddisfa tutti gli standard e i requisiti internazionali.

Quali infezioni possono essere diagnosticate con la PCR

Invia per la diagnostica, o. UNanalisi PCRpermette di diagnosticare un'ampia varietà di infezioni. Questo gruppo include anche malattie nascoste e asintomatiche che si trovano nel periodo di incubazione:

attraverso Metodo PCRpotete trovare:

  • epatite C, B;
  • ureaplasmosis degli organi genitali;
  • - ureaplasmosis, tricomoniasi, gardnerellosi;
  • clamidia dei genitali e delle vie respiratorie;
  • vaginosi batterica;
  • Mononucleosi infettiva;
  • tubercolosi;
  • salmonellosi;
  • tubercolosi (forme polmonari ed extrapolmonari);
  • listeriosi, encefalite da zecche, malattia di Lyme;
  • , papillomavirus,;
  • malattie infettive infantili rilevate durante la gravidanza e prima del concepimento - parotite, difterite, morbillo;
  • HIV.

Per ciascuna delle suddette malattie, rilevate con un altro metodo, è consigliabile eseguire uno studio PCR. Gli agenti causali di molte infezioni sono di diversi tipi (ceppi) e una diagnosi più accurata rende il trattamento più efficace. Poiché diversi tipi di agenti patogeni hanno le proprie modalità di trasmissione, un'identificazione accurata dell'agente patogeno aiuta a proteggere gli altri dall'infezione. Ad esempio, l'epatite A può essere contratta attraverso oggetti e utensili condivisi (malattia delle mani sporche) e l'epatite C può essere trasmessa solo attraverso il sangue, strumenti medici e rapporti sessuali. Questo è importante per coloro che sono vicino al paziente.

L'essenza del metodo della reazione a catena della polimerasi

Il metodo si basa sull'identificazione dell'agente patogeno mediante sezioni di DNA o RNA. La PCR è simile alla scienza forense, quando un criminale viene trovato da particelle di pelle o capelli lasciate sulla scena di un crimine. Perché ogni organismo vivente ha una struttura unica di DNA o RNA. Il metodo consente di identificare con precisione un microrganismo, anche se è presente nel materiale di prova in quantità minime.

La PCR è adatta per rilevare il trasporto nascosto, atipico, cancellato e altre forme di malattie infettive. La diagnostica è estremamente accurata, quindi praticamente non fornisce errori e risultati falsi. Un'analisi viene spesso prescritta come esame aggiuntivo per identificare un tipo specifico di virus o microbo.

Vantaggi e svantaggi del metodo PCR

L'analisi PCR è uno strumento diagnostico efficace che consente al medico non solo di determinare correttamente il tipo di agente infettivo nel corpo del paziente, ma anche il numero di microbi. Questa funzione consente al metodo PCR di rilevare efficacemente le infezioni croniche, ad esempio l'epatite virale.

I vantaggi della tecnica sono i seguenti:

  • Versatilità ... Il metodo consente di determinare tutti i microrganismi attualmente conosciuti, indipendentemente dal tipo di materiale in studio.
  • Specificità ... La PCR consente di determinare il DNA di un virus o di un batterio con una precisione del 100%, il che non fornisce nessun altro metodo diagnostico.
  • sensibilità - anche un minuscolo "frammento" di DNA o RNA può essere rilevato e identificato grazie alla rapida reazione di copiatura.
  • Prontezza - è possibile formulare una diagnosi basata sulla reazione a catena della polimerasi entro poche ore dal prelievo del materiale biologico, che consente di iniziare tempestivamente la cura della malattia.
  • Capacità di analisi quantitativa ... Questa caratteristica è importante per identificare le malattie causate dalla flora opportunistica (ad esempio il mughetto). L'aumento del contenuto di funghi candida nel corpo causa la malattia e la quantità normale è fino a 10 3 - 104 CFU / tampone. - No.

Gli svantaggi della diagnostica PCR sono la necessità di apparecchiature ad alta tecnologia e specialisti altamente qualificati. Per l'analisi è necessaria una scatola laminare speciale, dove viene mantenuta la temperatura richiesta e viene garantita la purezza dell'esperimento.

Come superare correttamente il test PCR: preparazione

Per capire esattamente come prepararsi per l'imminente analisi PCR, il paziente deve assolutamente verificare con il proprio medico che tipo di materiale biologico si prevede di prelevare. La preparazione dipende direttamente da questo.

  • Scarico dai genitali, una macchia dalla cervice o dall'uretra, urina: attraverso lo studio di queste varianti del materiale con il metodo PCR, le infezioni degli organi genitali vengono efficacemente diagnosticate.
  • L'epatite virale C, l'infezione da HIV richiedono il prelievo di sangue per l'analisi PCR.
  • Usando un tampone faringeo, puoi confermare o negare la presenza di mononucleosi infettiva.

Spalmare nelle donne

Per la diagnosi di infezioni genitali mediante PCR nelle donne, di regola, prendono tampone vaginale... Durante la gravidanza si applicano le regole standard per la preparazione all'analisi PCR.

  • Un paio di giorni prima della PCR, devi rinunciare a irrigazioni e prodotti per l'igiene intima.
  • Una settimana prima dell'analisi delle infezioni, vale la pena interrompere l'uso di qualsiasi tipo di farmaco, ovviamente, se non sono inclusi nel programma di preparazione per l'analisi PCR prescritta dal medico.
  • Un paio di giorni prima dell'esame, è necessario iniziare ad astenersi dal rapporto.
  • Il lavaggio il giorno dell'analisi PCR non è necessario, l'igiene dei genitali viene effettuata la sera prima, viene utilizzata solo acqua calda.
  • Non puoi urinare un paio d'ore prima del test.

Spalmare negli uomini

Prepararsi a raccogliere uno striscio dall'uretra per la PCR è facile. È sufficiente seguire le regole riportate di seguito.

  • 2 giorni prima dell'esame PCR, è necessario iniziare ad astenersi dai rapporti sessuali.
  • I farmaci vengono sospesi circa 7 giorni prima dell'analisi, a meno che, ovviamente, non siano stati specificamente prescritti dal medico.
  • L'igiene genitale dovrebbe essere eseguita la sera prima; il giorno dell'analisi PCR, questo non dovrebbe essere fatto.
  • Si raccomanda di non urinare per circa 2-3 ore prima di eseguire il test.

analisi del sangue

Se nel processo di analisi PCR il sangue del paziente diventa oggetto di studio, le regole per prepararlo sono le seguenti.

  • Il momento ottimale per donare il sangue è la mattina, il test deve essere effettuato a stomaco vuoto (almeno 8 ore senza cibo). L'acqua può essere bevuta liberamente.
  • Smettere di bere un giorno prima del test PCR, smettere di fumare un'ora prima.
  • Se la salute consente tale opzione, si consiglia di interrompere l'assunzione di farmaci per un po'.
  • Prima di prelevare campioni di sangue, è imperativo riposare per circa 20 minuti.
  • Alla vigilia degli studi PCR, i sovraccarichi emotivi e fisici sono completamente esclusi, possono influenzare i risultati dell'analisi.

Come viene eseguito il test PCR?

Per la ricerca, viene preso qualsiasi ambiente in cui può essere localizzato l'agente patogeno, ma il più delle volte vengono utilizzati:

  • Siero sanguigno o plasma - identificare una varietà di agenti patogeni: virus dell'epatite B, C, D, G, herpes, HIV, citomegalovirus;
  • Urina e succo prostatico - nella diagnosi delle malattie sessualmente trasmissibili;
  • Espettorato, liquido pleurico, lavaggio broncoalveolare - per la diagnosi delle forme polmonari ed extrapolmonari di tubercolosi;
  • Liquido cerebrospinale - per la diagnosi delle infezioni del sistema nervoso;
  • Liquido amniotico - determinare infezioni intrauterine;
  • tampone faringeo - identificare gli agenti causali della mononucleosi infettiva e della difterite;
    raschiati e strisci dalle mucose per la diagnosi delle malattie sessualmente trasmissibili;
    cellule della mucosa gastrica e del succo gastrico - per identificare i batteri Helicobacter, che causano gastrite e ulcere.

Con un campionamento del materiale, è possibile rilevare contemporaneamente diversi agenti patogeni che sono entrati nel corpo. Questa versatilità salva il paziente da ulteriori esami e spese inutili.

È possibile rilevare e identificare sezioni di informazioni genetiche utilizzando speciali marcatori di DNA di riferimento (primer) creati per ciascun agente patogeno noto. Lo standard ti consente di trovare il "tuo" frammento tra milioni di altri. Se ciò accade, viene attivata la reazione a catena della polimerasi.



La reazione PCR produce un numero enorme di copie della regione identificata delle informazioni sul gene (replica). È importante che vengano replicate solo le regioni del DNA e dell'RNA necessarie per l'analisi. Pertanto, la purezza dell'esperimento e la capacità del personale di maneggiare apparecchiature e campioni sono così importanti.

La reazione a catena procede molto rapidamente, dopo due ore la sezione del DNA viene ingrandita milioni di volte, il che consente di rilevare e identificare con precisione l'infezione. Per lavorare con gli standard, le provette vengono posizionate in un dispositivo speciale. Con l'aiuto del programma, viene impostato un algoritmo che cambia più volte la temperatura del mezzo e influenza il corso della reazione. Il risultato della PCR è visibile immediatamente dopo la fine dello studio.

Come decodificare l'analisi PCR

La realizzazione di uno studio PCR permette non solo di stabilire il tipo di infezione presente nell'organismo del paziente, ma anche di valutarla da un punto di vista quantitativo (il numero di microbi). La decifrazione dei risultati quantitativi della PCR svolge un ruolo importante nel rilevare e verificare l'efficacia del trattamento per un gran numero di malattie croniche, come l'epatite C.

Il risultato dell'analisi PCR può essere risposte positive e negative.

  • Risultato negativo ... Non sono state rilevate tracce di infezione nel materiale biologico, oggetto di studio durante l'analisi PCR. Di norma, sulla base di un risultato negativo, si può presumere che non vi sia effettivamente alcuna infezione nel corpo.
  • Risultato positivo. Questo risultato dell'analisi PCR indica che nel materiale biologico del paziente sono presenti tracce di una malattia infettiva. Un risultato positivo del test PCR è caratterizzato da un alto grado di accuratezza.

A volte l'infezione viene rilevata sullo sfondo della completa salute e dell'assenza di segni della malattia. Alcuni pazienti ritengono che l'analisi sia stata eseguita in modo errato, ma la situazione reale è diversa. Se la PCR ha mostrato che c'è un agente patogeno nel corpo, allora è davvero lì. È solo che le malattie infettive non iniziano mai subito dopo l'infezione, avendo un periodo di incubazione di durata variabile.

Il periodo di latenza può durare molto a lungo, ad esempio nell'AIDS - diversi anni, fino a quando alcuni meccanismi spingono i virus a moltiplicarsi. L'agente patogeno è determinato nel corpo dei portatori e di coloro che non sono stati curati. Molto spesso varie malattie sessualmente trasmissibili si trasformano in una forma latente (latente). In questo caso, potrebbe essere necessaria un'ulteriore diagnostica di laboratorio.

Precisione di interpretazione dei risultati dell'analisi PCR

Il metodo PCR, che consente di rilevare un numero sufficientemente elevato di infezioni, è caratterizzato da maggiore accuratezza, sensibilità e specificità. Queste caratteristiche indicano che utilizzando uno studio PCR è possibile:

  • Stabilire nel modo più accurato possibile l'assenza o la presenza di un agente infettivo.
  • Determinare il più accuratamente possibile il tipo specifico di agente infettivo (specificità).
  • Identifica l'infezione anche se è latente. Si tratta di un basso livello di DNA microbico (sensibilità) nel materiale biologico del paziente in esame.

I vantaggi del metodo PCR rispetto al saggio immunoassorbente legato all'enzima e altri strumenti immunologici per rilevare l'infezione è che è meno probabile che dia risultati errati. Cioè, la decodifica dell'analisi PCR mostra molto meno spesso l'assenza di microbi infettivi, se si trovano nel corpo del paziente.

Inoltre, non accade quasi mai che la decodifica dell'analisi riveli la presenza di un'infezione inesistente nel corpo, cioè dia risultati falsi positivi.Naturalmente, è ancora impossibile chiamare i risultati della PCR corretti al 100%, pertanto è necessario integrare questo studio con altri metodi.

Contenuto

Coloro che sono interessati a nuovi metodi diagnostici dovrebbero scoprire cos'è il metodo PCR. Le moderne capacità tecniche nel campo della ricerca di laboratorio forniscono la capacità di rilevare molte malattie nelle fasi iniziali. La reazione a catena della polimerasi (PCR) è attualmente considerata il metodo più accurato e nuovo.

Analisi PCR

Analisi PCR: che cos'è? Questo metodo utilizza i principi della biologia molecolare. Per studiare il materiale vengono utilizzati enzimi speciali che copiano ripetutamente e rapidamente DNA, frammenti di RNA di agenti patogeni. Esistono diversi tipi di analisi PCR a seconda del materiale in esame (sangue, urina, feci, ecc.). Dopo l'elaborazione, il personale del laboratorio confronta il risultato ottenuto con il database, identifica la concentrazione, il tipo di agente patogeno.

L'analisi PCR viene posta in uno speciale amplificatore (dispositivo), che riscalda e raffredda i tubi con biomateriale. Sono necessari cambiamenti di temperatura per replicare i frammenti. L'accuratezza del risultato dipenderà dall'accuratezza del regime di temperatura. Il metodo della reazione a catena della polimerasi aiuta a identificare:

  • Mononucleosi infettiva;
  • infezione da citomegalovirus;
  • epatite virale G, C, B, A;
  • infezioni/malattie sessualmente trasmissibili (IST/MST): gardnerellosi, tricomoniasi, ureaplasmosi;
  • infezione da herpes;
  • virus oncogeni;
  • listeriosi;
  • infezione da Helicobacter pylori;
  • encefalite da zecche, borreliosi;
  • tubercolosi;
  • candidosi.

Sangue

Al momento, a causa della novità della tecnologia, l'analisi del sangue PCR ha ancora un prezzo elevato. Per preparare un biomateriale, non è necessario soddisfare determinati requisiti. Anche i cambiamenti nella composizione causati dallo sforzo fisico, dallo stress e da un cambiamento nella dieta non influiscono sul risultato dello studio. Un esame del sangue PCR può solo rovinare l'assunzione di agenti antibatterici, quindi, prima di prenderlo, è necessario fare una pausa tra il trattamento e il test.

L'analisi del sangue PCR è l'opzione più comune per diagnosticare patologie infettive croniche e acute con una manifestazione virale o atipica. I metodi di ricerca sierologica hanno una certa difficoltà nel condurre: la determinazione della presenza dell'agente patogeno viene effettuata dalla presenza di anticorpi nel corpo umano. Il risultato potrebbe essere falso negativo se le condizioni del paziente non lasciassero il tempo per il loro sviluppo.

striscio

Nel campo della ginecologia, l'analisi dello striscio PCR viene utilizzata per indagare la presenza di microrganismi infettivi. Il lavoro con il materiale viene eseguito secondo lo stesso principio del sangue: un aumento multiplo dei frammenti di DNA dell'agente patogeno per identificarlo facilmente. Aiuta anche a rilevare le infezioni nascoste in una donna. Per l'analisi possono essere prelevati diversi fluidi biologici: saliva, espettorato, urina, sangue. In ginecologia, per l'accuratezza della determinazione, viene spesso utilizzato uno striscio dalla mucosa vaginale dal canale cervicale.

Ci sono alcune indicazioni per la PCR. Spesso deve essere fatto per identificare un patogeno resistente agli antibiotici. Nelle donne, le principali indicazioni per la diagnostica che utilizzano questo metodo sono:

  • gravidanza che è difficile;
  • fase acuta delle malattie sessualmente trasmissibili;
  • se c'è il sospetto della transizione delle malattie sessualmente trasmissibili allo stadio cronico;
  • ricercare le cause dell'infertilità.

Kala

Per rilevare l'infezione, il medico può prescrivere un test PCR delle feci. Per ottenere i risultati più affidabili dopo il test, è necessario rispettare le seguenti regole prima di campionare il biomateriale:

  • interrompere l'assunzione di lassativi in ​​pochi giorni: oli, supposte;
  • escludere i medicinali che danno un colore specifico alle feci, ad esempio con contenuto di ferro.

Per la raccolta devono essere utilizzati un bastoncino e un contenitore sterili. Puliteli con altro, non è necessario risciacquarli. Quando si raccoglie materiale, fare attenzione a non toccare l'interno del contenitore con la mano. Assicurati che non ci siano impurità di urina nelle feci, non puoi usare aiuti aggiuntivi per i movimenti intestinali (clistere). È necessario ritirare il materiale il giorno della consegna, è sufficiente 1/3 del volume del contenitore. Questo metodo diagnostico presenta i seguenti vantaggi:

urina

Se necessario, il medico può prelevare l'urina per il test per il test. L'elevata precisione consente di lavorare con qualsiasi fluido biologico da cui è possibile estrarre il DNA del virus. Per superare un test delle urine PCR, è necessario rispettare le seguenti restrizioni prima di prendere il materiale:

  • smettere di fare sesso almeno 1 giorno prima della procedura;
  • 3 settimane prima della consegna, qualsiasi trattamento antibatterico deve essere completato, perché i farmaci sporcheranno l'immagine;
  • devi fare un'analisi a stomaco vuoto (è vietato anche il liquido);
  • devi prendere la prima porzione mattutina del materiale.

Risultati del test PCR

Da quanto sopra, è chiaro cosa sia l'analisi PCR e sono evidenti i vantaggi di questo metodo di ricerca. Un altro vantaggio di questa procedura diagnostica è la facilità di decodifica dei risultati. Considerando la quantità di analisi PCR (il processo stesso richiede circa 5 ore, ma il laboratorio fornisce i dati dopo 1-2 giorni), questo metodo diagnostico diventa l'opzione migliore per identificare molte infezioni. Sulla base dei risultati, il medico potrebbe dirti che il test:

  1. Negativo: il materiale studiato non conteneva l'agente patogeno desiderato.
  2. Positivo: sono stati trovati RNA e DNA dell'agente patogeno.

I microrganismi sono talvolta quantificati. Ciò è necessario per le malattie che causano agenti patogeni opportunistici. La particolarità di questi virus è che compaiono solo quando sono in eccesso ed è estremamente problematico trovarli dalla ricerca convenzionale. Questo fattore è importante per la scelta delle tattiche terapeutiche per trattare efficacemente le infezioni virali, ad esempio l'epatite, l'HIV.

Per 12 infezioni

Per comprendere appieno quale sia la diagnostica PCR delle infezioni e quanto sia efficace, è necessario sapere che è in grado di isolare fino a 12 agenti patogeni. Il testo è svolto solo in un ambiente di laboratorio. Per la ricerca vengono utilizzati enzimi speciali che moltiplicano la quantità di RNA, DNA di frammenti di virus. L'analisi PCR per 12 infezioni può rilevare:

  • micobatterio tubercolosi;
  • citomegalovirus;
  • epatite C, G, B, A;
  • herpes 1, 2 tipi;
  • virus di Epstein-Barr (mononucleosi infettiva);
  • infezioni trasmesse sessualmente, come la clamidia;
  • listeriosi;
  • infezione da candida;
  • Helicobacter pylori;
  • borreliosi, encefalite da zecche.

Per l'epatite C

Questo metodo diagnostico aiuta a determinare la presenza del virus nel sangue. Questo dà ai medici l'opportunità di parlare della sua presenza o assenza. L'analisi PCR per l'epatite C è di due tipi: qualitativa e quantitativa. La prima opzione indica solo la sua presenza e può avere la formulazione “rilevato” / “non rilevato”. Questo tipo di test ha una sensibilità di 10-500 UI/ml. Ciò suggerisce che con un basso contenuto dell'agente patogeno nel corpo, l'analisi non verrà rilevata.

L'analisi quantitativa è più accurata e mostrerà la concentrazione dell'infezione nel sangue. Questo indicatore è designato come "carica virale", è misurato nella quantità di RNA virale per un volume specifico di sangue. La decrittazione in diversi laboratori può differire. Oltre alla misura in IU/ml vengono utilizzate le unità di misura “copia”. Puoi ricalcolare le copie in UI utilizzando la formula: 1 UI = 4 copie. Se nella decodifica il valore della presenza del virus supera 800.000 IU / ml (o 800 * 103), questo indica un alto contenuto dell'agente patogeno.

Per la tubercolosi

Il test dovrebbe essere fatto al mattino. Questo è importante per evitare che l'intero corpo del catarro che si è formato durante la notte esca dallo stomaco. L'analisi PCR per la tubercolosi è importante quanto ELISA, Mantoux, tomografo. Il test aiuta a evidenziare la presenza di micobatteri, lo stato delle urine, l'immunoglobulina totale, la VES, per determinare lo stato dei polmoni al momento. Per l'accuratezza dell'ottenimento dei risultati durante l'analisi della PCR, deve essere eseguita in conformità con le seguenti regole:

  1. La semina viene eseguita 3 volte, ma l'aspirazione completa del contenuto dello stomaco deve essere eseguita solo in ambiente ospedaliero.
  2. Rivela i micobatteri seminando le masse presenti nello stomaco in meno del 50% delle diagnosi. Anche quando si ottengono le condizioni ottimali, si consiglia invece un'ecografia.
  3. Anche se il risultato è negativo, la probabilità di sviluppare la tubercolosi con un cambiamento di VES, immunoglobuline o altri indicatori non può essere completamente esclusa.
  4. Le colture di materiali per la PCR sono meno suscettibili a condizioni patologiche se ottenute come parte di un esame broncoscopico, che esclude sospetti di tubercolosi in un bambino.

Per l'HIV

Per molte persone, questa diagnosi è considerata una condanna a morte. Per questo motivo, dopo frequenti rapporti sessuali, una persona diventa più attenta ai segnali che il suo corpo dà (ea volte li emette). Il modo più affidabile per ottenere conferma o confutazione di questa malattia è l'analisi PCR per l'HIV. Il test può essere utilizzato per identificare i seguenti possibili problemi di salute:

  1. Confutazione/conferma della presenza dell'HIV durante il periodo sieronegativo.
  2. Determinazione del genotipo di HIV-1, HIV-2.
  3. Chiarimento della descrizione del processo patologico con un dubbio risultato di immunoblot.
  4. Infezione dopo trasfusione di sangue.
  5. Determinazione dello stato di HIV nei bambini nati da madri portatrici della malattia.
  6. Aiuta a stabilire il monitoraggio della carica virale del corpo.

HPV

Il papillomavirus può essere rilevato in qualsiasi persona, per lungo tempo può essere in uno stato latente. Lo sviluppo provoca un indebolimento del sistema immunitario, stress o esplosioni emotive. Un test HPV PCR aiuta a determinare la concentrazione del virus nel sangue. Per questo motivo si consiglia di effettuare una determinazione quantitativa piuttosto che qualitativa. Questi dati aiuteranno a prevedere la probabilità di sviluppare un'infezione maligna.

Il metodo per diagnosticare la presenza di HPV si basa sulla proprietà principale della PCR di isolare il DNA del virus dal materiale. A causa dell'elevata sensibilità del test, verranno rilevate anche piccole quantità di batteri. La ricerca quantitativa apre la possibilità ai medici di determinare il grado di pericolosità della malattia, di fare previsioni per il futuro. Questa diagnosi è obbligatoria per tutti gli uomini e le donne che hanno trovato le verruche in se stessi. L'analisi quantitativa della PCR aiuterà a determinare cosa ha causato lo sviluppo dell'HPV: una diminuzione temporanea dell'immunità o una malattia cronica.

Per l'herpes

Questo tipo di diagnostica in microbiologia aiuta a eseguire analisi PCR per l'herpes con elevata precisione. La copiatura dei frammenti di DNA del virus avverrà solo se il gene richiesto è presente nel materiale. In questo caso, un test basato sui risultati della condotta può indicare la presenza o l'assenza dell'agente patogeno. Sarà possibile rilevarlo anche con una bassa concentrazione nel sangue.

Un altro vantaggio dell'analisi PCR è che può rilevare un'infezione virale da herpes immediatamente dopo l'infezione, prima dell'insorgenza dei sintomi clinici. È possibile determinare il tipo di herpes (1 o 2), non è necessaria una preparazione specifica per superare l'analisi, ma i medici raccomandano che prima di prelevare il sangue si rifiuti:

  • fritto;
  • piccante;
  • alcool;
  • Grasso.

Durante la gravidanza

Quando si trasporta un bambino, è molto importante condurre questa ricerca per registrare le condizioni della donna. L'analisi PCR durante la gravidanza è uno dei metodi più efficaci per determinare la presenza di varie malattie. È necessario condurre un test non solo per identificare le patologie, ma anche per determinare la probabilità di infezione del bambino in utero. Solo grazie alla diagnostica PCR è stato possibile identificare il grado di progressione, lo sviluppo di molte infezioni all'interno dell'utero.

Consegna dei test PCR

Se sei interessato a come viene eseguita un'analisi PCR, allora dovrebbe essere considerato ogni singolo caso, tenendo conto del tipo di biomateriale. Raschiatura, striscio o prelievo di sangue ha le sue caratteristiche, ad esempio.

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo di diagnostica genetica molecolare ad alta precisione, che consente di rilevare varie malattie infettive ed ereditarie nell'uomo, sia nelle fasi acute che croniche, e molto prima che la malattia possa manifestarsi.

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è stata sviluppata nel 1983 da Carey Mullis (USA), per la quale è stato insignito del Premio Nobel per la Chimica nel 1993.

L'analisi della PCR è diventata una sorta di "standard di riferimento" per la maggior parte delle infezioni. La maggior parte degli specialisti lo incontra quasi ogni giorno e non può immaginare di fare una diagnosi finale senza di esso. La PCR diventa spesso l'unica reazione per identificare gli stadi attivi della malattia in quei momenti in cui altri metodi diagnostici batteriologici, virologici, immunologici non funzionano.

I vantaggi della diagnostica PCR nella medicina moderna:

Rilevazione diretta della presenza dell'agente patogeno (ovvero, una regione specifica di DNA o RNA dell'agente patogeno) nel campione in esame.
L'elevata specificità consente di determinare un pezzo unico di DNA o RNA, caratteristico di un particolare agente patogeno, che esclude la possibilità di false reazioni.
L'elevata sensibilità del metodo PCR consente di rilevare anche singole cellule di agenti patogeni (virus, batteri). La sensibilità dell'analisi PCR è di 10-1000 cellule nel campione del test (ad esempio, la sensibilità dei test immunologici e microscopici è solo di 103-105 cellule).
Sviluppo di una tecnica PCR universale per la rilevazione di vari agenti patogeni. L'oggetto della ricerca con il metodo PCR è il materiale genetico (DNA, RNA) del patogeno. La tecnica consente di identificare diversi agenti patogeni da un campione biologico.
Ottenimento sufficientemente rapido del risultato dell'analisi. Uno studio completo viene eseguito in 4-4,5 ore, meno spesso un po' più a lungo.
Possibilità di rilevare gli agenti patogeni prima dell'insorgenza dei sintomi della malattia (diagnosi preclinica) e dopo una malattia pregressa (diagnosi retrospettiva). Un esempio di diagnostica preclinica sarebbe un esame durante il periodo di incubazione (dal momento dell'infezione fino all'inizio dei reclami del paziente), così come l'infezione latente (quando non ci sono sintomi, ma ci sono solo dati di laboratorio - PCR, Per esempio). Uno dei punti importanti della diagnostica PCR è la PCR nel materiale d'archivio o nei residui biologici, che è importante per identificare una persona o la paternità.

Attualmente, la diagnostica PCR è in fase di sviluppo significativo. Il metodo stesso viene migliorato, nuove varietà di PCR appaiono ancora e ancora, nuovi sistemi di test per questa reazione stanno entrando nel mercato medico. Grazie a ciò, il costo degli studi PCR diventa ogni anno più accessibile per un'ampia gamma di pazienti.

Su cosa si basa il metodo PCR?

La base della reazione a catena della polimerasi è il raddoppio multiplo (amplificazione) di una determinata regione di DNA o RNA utilizzando enzimi in laboratorio. Di conseguenza, si forma quella quantità di DNA o RNA, sufficiente per l'analisi visiva. Nel corso dello studio viene copiata solo quella sezione che si adatta alle condizioni date, e solo nella situazione della sua presenza nel campione di prova.

Ad esempio, il materiale per la ricerca, in cui si presume che vi siano frammenti di DNA o RNA dell'agente patogeno (saliva, sangue, urina, secrezioni dai genitali), viene inserito in un reattore speciale (amplificatore). Inoltre, vengono aggiunti enzimi specifici che si legano al DNA o all'RNA dell'agente patogeno e ne viene sintetizzata una copia. Questa copiatura avviene in più fasi a seconda del tipo di "reazione a catena", e alla fine si possono formare centinaia e migliaia di copie da una copia del materiale genetico. Segue poi l'analisi e il confronto del risultato con il database disponibile sulla struttura dei vari agenti patogeni. Mediante PCR, è possibile non solo identificare il tipo di agente patogeno, ma anche fornire un risultato quantitativo dell'analisi, ovvero quanti agenti patogeni ci sono nel corpo umano.

Il metodo PCR sta attualmente ampliando la gamma di opportunità di ricerca: l'introduzione di mutazioni, lo splicing di frammenti di DNA e si è diffuso in medicina, ad esempio, per stabilire la paternità, l'emergere di nuovi geni, ecc.

Quali infezioni possono essere rilevate utilizzando la diagnostica PCR

1) Infezione da HIV (il virus dell'immunodeficienza umana HIV-1 può essere rilevato)
2) Epatite virale A, B, C, G (RNA-HAV, DNA-HBV, RNA-HCV, RNA-HGV)
3) Mononucleosi infettiva (DNA del virus Epstein-Barr-EBV)
4) Infezione da citomegalovirus (DNA-CMV)
5) Infezione da herpes (DNA - virus herpes simplex HSV tipi 1 e 2)
6) malattie sessualmente trasmissibili (infezioni a trasmissione sessuale) - ureaplasmosi, gardnerellosi, clamidia, micoplasmosi, tricomoniasi,
7) Tubercolosi (Mycobacterium tuberculosis)
8) Virus oncogeni - infezione da papillomavirus umano (papillomavirus umano (compresi i suoi tipi oncogeni 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58 e 59)
9) Borreliosi, encefalite da zecche
10) Listeriosi
11) Candidosi (funghi del genere Candida)
12) Infezione da Helicobacter pylori
Altro

Data la gamma di agenti patogeni, la diagnostica PCR viene utilizzata attivamente nella pratica ginecologica, urologica, nella pratica di uno specialista in malattie infettive, in pneumologia, tisiologia, gastroenterologia, ematologia, oncologia e altri.

Materiale per la ricerca e regole per la sua raccolta

Il materiale per la ricerca PCR, in cui è possibile identificare DNA estraneo di batteri o DNA o RNA di un virus, può essere vari mezzi biologici e fluidi umani: muco, urina, sangue, espettorato, raschiamento di cellule epiteliali, tessuti placentari, sangue, succo prostatico, liquido amniotico, liquido pleurico.

Durante lo screening per le infezioni sessualmente trasmissibili (IST), lo scarico dai genitali, uno striscio o un raschiamento dalla cervice, uno striscio o un raschiamento dall'uretra (uretra), l'urina viene prelevata da uomini e donne.

Quando si esegue il test per le infezioni (infezioni da herpes, CMVI, mononucleosi, toxoplasmosi, epatite B, C, infezione da HIV), il sangue viene prelevato per la PCR.

Per diagnosticare la mononucleosi infettiva, il CMVI, l'infezione da herpes, viene prelevato un tampone dalla gola e l'urina viene prelevata per l'esame per il CMVI. Spesso, per l'esame del danno al sistema nervoso, in numerosi studi viene prelevato il liquido cerebrospinale.

In pneumologia, il materiale è espettorato, liquido pleurico.

Quando si esaminano le infezioni intrauterine - liquido amniotico, tessuto placentare.

Preparazione per la consegna del materiale e diagnostica PCR

Quasi tutti i pazienti che si sottopongono alla diagnostica PCR hanno il diritto di contare su un risultato affidabile, accurato e rapido, che dipende in larga misura dalle capacità del laboratorio e dalla professionalità dell'assistente di laboratorio. Allo stesso tempo, molti non pensano che questa stessa affidabilità dipenda in gran parte da noi stessi, vale a dire dalle raccomandazioni del medico curante, dallo stile di vita e dalla correttezza del campionamento del materiale. Quando si campiona il materiale, sono richieste condizioni che escludano la contaminazione (contaminazione) del materiale e, di conseguenza, mettano in discussione l'obiettività dell'analisi.

La corretta preparazione alla consegna del materiale non è particolarmente difficile. Ci sono le seguenti raccomandazioni dei medici per i pazienti:

1) non vivere sessualmente il giorno prima della consegna del materiale;
2) il sangue per la ricerca viene somministrato al mattino a stomaco vuoto (non mangiare, non bere);
3) quando si somministra l'urina, la prima porzione mattutina viene raccolta in un contenitore pulito e sterile.

I tempi di preparazione dell'analisi PCR

Il risultato finale è pronto in 1,5-2 giorni dalla consegna del materiale. In alcuni casi, il risultato è pronto già dal primo giorno.

Decodifica dei risultati della PCR

Negativo il risultato della PCR indica che non sono state trovate tracce di agenti infettivi nel materiale di prova al momento della consegna. La maggior parte dei casi mostra l'assenza dell'infezione che si è tentata di riscontrare nel campione in esame.

Positivo il risultato della PCR indica la rilevazione di tracce di infezione nel campione biologico in esame. Con grande precisione, un risultato positivo indica la presenza di infezione in un dato momento.

Ci sono situazioni in cui la PCR è positiva, ma è impossibile parlare di un'infezione attiva - questa è la cosiddetta "carrozza sana" senza sintomi clinici della malattia, che non richiede trattamento, ma richiede l'osservazione dinamica da parte di un medico. Si osserva più spesso in una serie di infezioni virali (HPV, CMVI, infezione da EBV, infezione da herpes e altre) in materiali come saliva, raschiamento del canale cervicale, uretra, cioè da un focus locale. Tuttavia, non dobbiamo dimenticare che è possibile la trasmissione dell'infezione da portatori a persone sane, così come è possibile una transizione verso una forma cronica della malattia con l'attivazione del processo. Se la PCR è positiva nel sangue, allora questo non è più un portatore e richiede un trattamento specifico.

Il risultato quantitativo della PCR viene valutato solo dal medico individualmente per una particolare infezione separatamente e non ha gradazioni generali. Sulla base del risultato quantitativo della PCR, il medico può determinare il grado di attività dell'infezione e impostare lo stadio della malattia, che influenzerà sicuramente il decorso e le dosi dei farmaci prescritti.

Una delle ultime domande preoccupanti: quanto è accurata la diagnostica PCR?

Ci sono 3 definizioni per l'analisi PCR:

1. Precisione (con un alto grado di probabilità, è possibile il rilevamento o l'assenza di infezione).
2. Specificità (accuratezza nel rilevare un'infezione specifica).
3. Sensibilità (anche con un basso contenuto del materiale genetico di agenti patogeni nel campione di prova, l'infezione verrà rilevata).

La reazione a catena della polimerasi praticamente non dà risultati falsi positivi (cioè, non ci sono campioni positivi dove non c'è infezione). I risultati falsi negativi sono rari (più spesso ciò è dovuto all'assenza di un'infezione attiva in una persona al momento). Ad esempio, infezione latente, infezione cronica senza attività.

Medico di malattie infettive N.I. Bykova

Video sul perché e come eseguire un test PCR per le infezioni

La PCR (reazione a catena della polimerasi) è una conquista della biologia molecolare, uno dei principali metodi di diagnostica clinica di laboratorio della fine del XX e dell'inizio del XXI secolo, che apporta enormi benefici in vari campi della scienza medica.

Pertanto, anche se non il virus vivente stesso viene perso tra i milioni di cellule del corpo umano, ma solo una particella del suo DNA, allora la PCR, se nulla interferisce con esso, probabilmente farà fronte al compito e riporterà la presenza di un "straniero" con esito positivo. Questa è l'essenza della PCR e il suo principale vantaggio.

Vantaggi e svantaggi

I requisiti più elevati sono imposti al laboratorio che esegue la diagnostica PCR in termini di apparecchiature, sistemi di test e qualifiche del personale medico. Questo è un laboratorio ad alta tecnologia con un arsenale di reagenti altamente sensibili e altamente specifici, quindi non ha particolari inconvenienti. È qualcosa che dà un risultato positivo in assenza di manifestazioni cliniche e quindi pone il medico di fronte a un dilemma: vale la pena iniziare il trattamento o no?

Il medico che osserva il paziente inizia a dubitare dell'affidabilità dei risultati del test, poiché non vede alcun segno della malattia. Tuttavia, data l'elevata sensibilità del sistema PCR, va ricordato che rileva l'agente patogeno anche in fase preclinica, e un risultato positivo in questo caso è più un vantaggio che uno svantaggio. Sulla base di ciò, il medico curante deve decidere autonomamente sull'opportunità della terapia, tenendo conto di altri argomenti "pro" e "contro".

I vantaggi della diagnostica che utilizza la reazione a catena della polimerasi sono evidenti:

  • Alta specificità raggiungendo il 100%, a causa della presenza nel campione selezionato di particelle di acidi nucleici inerenti a un particolare organismo, ma estraneo all'uomo;
  • Alte prestazioni, perché la PCR è una tecnica automatizzata ad alta tecnologia che consente di condurre i test il giorno del prelievo e alleviare così il paziente da inutili preoccupazioni;
  • La PCR, lavorando su un campione, è in grado di effettuare diversi studi e circa trovare più agenti patogeni se ha un tale compito. Ad esempio, quando si diagnostica l'infezione da clamidia, dove la PCR è uno dei metodi principali, insieme alla clamidia, è possibile rilevare anche la neisseria (gonococco), l'agente eziologico. Inoltre, ciò non pregiudica l'attendibilità dei risultati;
  • La PCR ti mette alla prova sono microrganismi pericolosi nel periodo di incubazione, quando non sono ancora riusciti a infliggere danni tangibili al corpo, cioè la diagnosi precoce avverte del futuro sviluppo del processo patologico, che consente di prepararsi e portarlo completamente armato.

Inoltre, al fine di evitare fraintendimenti che a volte sorgono durante la diagnostica, la PCR si tutela anche dal fatto che i suoi risultati possono essere registrati (fotografia, computer) per poterli utilizzare per scopi esperti, se necessario.

Un risultato negativo è considerato normale nelle risposte PCR. indicando l'assenza di frammenti di acidi nucleici estranei, una risposta positiva indicherà la presenza di infezione nel corpo, i valori digitali indicano lo stato del virus e la sua concentrazione al momento del test. Tuttavia, la decodifica completa dell'analisi viene eseguita da un medico che ha completato una formazione speciale sull'argomento "PCR". Cercare di interpretare i risultati da soli non ha alcun senso, dal momento che è possibile, cosa che probabilmente accadrà, fraintendere e iniziare a preoccuparsi in anticipo.

Di cosa ha "paura" la PCR, cosa può fare e come prepararsi?

Come in ogni altra ricerca, a volte i risultati dei test si rivelano falsi positivi o falsi negativi dove la PCR non fa eccezione. Questo può accadere nei seguenti casi:

  1. Violazioni del processo tecnologico in una delle fasi della reazione;
  2. Mancato rispetto delle regole per la raccolta del materiale, il suo stoccaggio o trasporto;
  3. La presenza di impurità nel materiale.

Ciò suggerisce che la diagnosi PCR delle infezioni deve essere affrontata con attenzione, attenzione e precisione, altrimenti i campioni del materiale possono cambiare la loro struttura strutturale o crollare completamente.

Fasi della diagnostica PCR. Risultati falsi possono dare violazioni in qualsiasi fase dello studio.

La diagnostica PCR delle infezioni appartiene alla categoria dei "gold standard" tra gli altri metodi di laboratorio, quindi può essere utilizzata per cercare agenti causali di molte malattie che, a prima vista, non hanno nulla in comune:

  • Tubercolosi di varia localizzazione, polmonite (anche atipica, causata da clamidia);
  • Infezioni infantili (rosolia del morbillo, parotite, morbillo);
  • Difterite;
  • Salmonellosi;
  • Malattia infettiva zoonotica - listeriosi (la malattia è caratterizzata da una varietà di sintomi con danni ai linfonodi, al sistema nervoso centrale, agli organi interni);
  • Malattie causate dalla penetrazione del virus Epstein-Barr (mononucleosi infettiva, ecc.);
  • Patologia oncologica provocata dall'infezione da papillomavirus (HPV e suoi tipi);
  • Borreliosi (malattia di Lyme, encefalite da zecche);
  • Infezione da Helicobacter pylori, il cui agente causale è il microbo Helicobacter pylori che vive nello stomaco umano. È stato dimostrato che l'Helicobacter pylori provoca lo sviluppo del cancro dello stomaco o del duodeno;
  • e quasi tutto.

La diagnostica PCR delle infezioni sessualmente trasmissibili è di particolare importanza, poiché le malattie causate in questo modo spesso procedono a lungo senza manifestazioni cliniche, ma durante la gravidanza iniziano a intensificarsi e, quindi, minacciano la salute e persino la vita del bambino . Si comportano allo stesso modo e. Alcuni di essi ("appiccicosi") si riferiscono anche a malattie sessualmente trasmissibili, quindi questi ultimi richiedono una considerazione più dettagliata. Il lettore sarà in grado di familiarizzare con le tecniche più popolari nelle sezioni seguenti dell'articolo.

Come prepararsi adeguatamente per ottenere un risultato affidabile?

Notiamo subito che la preparazione per la PCR è abbastanza semplice, non richiede sforzi particolari da parte del paziente. Hai solo bisogno di completare tre semplici compiti:

  1. Non avere rapporti sessuali 24 ore prima di fare il test;
  2. Per prelevare e analizzare il sangue da una vena, devi venire a stomaco vuoto, a proposito, non puoi nemmeno bere;
  3. Dovresti donare l'urina di notte (al mattino - in un barattolo sterile, acquistato il giorno prima in farmacia).

La PCR può funzionare in qualsiasi ambiente biologico

Il metodo PCR non differisce dalla "sete di sangue", quindi accetta qualsiasi ambiente biologico contenente il presunto agente infettivo. la scelta - ciò che deve essere preso per la ricerca, rimane al medico.

Pertanto, alla ricerca di un agente patogeno, oltre a un esame del sangue (sebbene sia anche adatto e nella maggior parte dei casi sia preso in parallelo con un altro materiale), è possibile utilizzare:

  • (scarico del tratto urogenitale);
  • Raschiatura delle mucose della cavità orale, congiuntiva, rinofaringe, tratto genitale (nelle donne vengono prelevate dalla cervice e dalla vagina, negli uomini - dall'uretra);
  • Saliva;
  • Sperma;
  • Succo di prostata;
  • Tessuto placentare e liquido amniotico (liquido amniotico);
  • Sedimento urinario (dopo centrifugazione), ad esempio, per rilevare alcune malattie sessualmente trasmissibili e Mycobacterium tuberculosis;
  • Espettorato e liquido pleurico per lo stesso scopo;
  • essudati;
  • Liquido cerebrospinale in caso di sospetto di lesione infettiva del sistema nervoso centrale;
  • Materiale bioptico (biopsia) prelevato da fegato, duodeno, stomaco, ecc.

A quanto sopra, vorrei aggiungere che ci sarà materiale sufficiente per i test in tutti i casi, anche nei raschiati e nelle secrezioni, poiché il test PCR non richiede grandi volumi, bastano pochi microlitri per l'analisi, che di solito viene portata in un Eppendorf microtubo e inviato allo studio.

Malattie e uso della PCR

HIV e reazione a catena della polimerasi

Di solito, quando si supera un esame anonimo in caso di risultati positivi dell'immunoblotting, la diagnosi viene ripetuta di nuovo. Se la diagnosi è confermata, al paziente vengono prescritti ulteriori studi:

  1. Determinazione mediante reazioni immunologiche dei valori assoluti del numero di linfociti CD 4 (cellule immunocompetenti - T-helper o helper), che l'infezione colpisce in primo luogo, dopo di che perdono le loro proprietà di base e non possono distinguere tra "nostro" e altri ". Confondono l'RNA del virus che circola nel plasma sanguigno per cellule normali del corpo e non reagiscono ad esse;
  2. Rilevazione dell'RNA virale mediante PCR e calcolo della concentrazione di particelle virali al fine di stabilire lo stadio, la gravità del processo patologico e la prognosi, tenendo conto di questi dati... Naturalmente, la parola "norma" non esiste a questo proposito, poiché la reazione è sempre positiva e la decodifica dei valori digitali è di competenza del medico.

PCR ed epatite

Il metodo PCR può rilevare gli agenti patogeni, molto spesso il test viene utilizzato per diagnosticare l'epatite C, che è scarsamente determinata da altri metodi.

Il virus dell'epatite C (contenente RNA) nel suo comportamento nel corpo umano assomiglia all'HIV. Incuneandosi nel genoma delle cellule epatiche (epatociti), rimane lì ad aspettare il suo tempo, che può arrivare anche tra 2 anni, anche tra 20 anni, così i medici lo chiamavano "killer affettuoso". L'epatite C porta alla formazione di un processo maligno nel parenchima epatico, che si manifesta nelle fasi successive. Il sistema immunitario non nota tutti questi eventi, scambiando il virus per l'epatocita. È vero, gli anticorpi contro il virus vengono prodotti in alcune quantità, ma non forniscono una risposta immunitaria decente. Per la diagnosi, l'ELISA per l'epatite C non è molto informativo, poiché indica che il virus ha lasciato tracce e se si è lasciato da solo non è noto. Nell'HCV sono noti casi di autoguarigione, mentre gli anticorpi contro il virus rimangono e continuano a circolare per tutta la vita (memoria immunologica). La PCR supera notevolmente la formazione di anticorpi e può rilevare una particella virale già dopo 1-1,5 settimane, mentre gli anticorpi possono comparire nell'intervallo da 2 mesi a sei mesi

La diagnostica PCR in caso di sospetto di un dilagante virus dell'epatite C nel corpo umano è il metodo di ricerca più ottimale, perché solo esso è in grado di riconoscere la presenza di un "nemico affettuoso" nel sangue o nella biopsia epatica del paziente.

Tuttavia, a volte ci sono casi in cui gli anticorpi sono positivi e il risultato della PCR è negativo. Questo a volte accade quando la quantità del virus è molto bassa o quando è "dormiente" nel fegato senza entrare nel flusso sanguigno. Per trovare ancora la verità, si fa al paziente un'analisi ripetuta, o anche più di una.

Infezione da papillomavirus umano

Se non si verifica l'autoguarigione, può anche, senza mostrarsi, persistere a lungo nel corpo dell'ospite, che nemmeno ne sospetta, poiché non è mai stata eseguita alcuna PCR, e non vi sono stati sintomi della malattia . Tuttavia, la presenza dell'infezione da papillomavirus, sebbene latente, è tutt'altro che indifferente alla salute umana, dove alcuni tipi di virus che causano il cancro (tipi 16, 18) sono particolarmente pericolosi.

Più spesso, la metà femminile della popolazione soffre di HPV, poiché il virus ama di più l'area genitale femminile, e soprattutto la cervice, dove alcuni tipi di virus contribuiscono allo sviluppo di processi displastici, e quindi il cancro del collo dell'utero, se la displasia non è trattati e il virus ha libero sfogo. Quindi, la reazione a catena della polimerasi rileverà il DNA virale e quindi indicherà il tipo "cattivo" o "buono" (oncogeno o non oncogeno) stabilito nel corpo della donna.

Altre malattie sessualmente trasmissibili e infezioni da TORCIA

Ovviamente, la reazione a catena della polimerasi può trovare qualsiasi struttura estranea costituita da acidi nucleici, quindi questo test è adatto per rilevare tutte le malattie sessualmente trasmissibili e le infezioni da TORCH, tuttavia non viene sempre utilizzato. Perché, diciamo, condurre studi così costosi per rilevare o gonococco, se ce ne sono di più convenienti ed economici?

Le infezioni da TORCH e le malattie sessualmente trasmissibili sono così interconnesse che a volte è difficile determinare a quale gruppo debba essere attribuito un particolare agente patogeno. In generale, può essere difficile comprenderli, poiché si tratta di gruppi piuttosto diversi di microrganismi che possono essere trasmessi sessualmente sempre o solo in determinate condizioni (immunodeficienza), e possono interessare solo durante la gravidanza, a causa del possibile effetto negativo su suo corso e sul feto.

La PCR è il metodo principale per rilevare le infezioni nascoste

Lo sviluppo delle manifestazioni cliniche si basa su diversi agenti patogeni, che possono essere trovati solo mediante PCR, che è il suo compito principale a volte insieme a ELISA, e talvolta come unico test di conferma, soprattutto se non ci sono sintomi della malattia. Una situazione così difficile può essere creata da un'infezione polimicrobica, che, oltre a patogeni evidenti, include anche patogeni opportunisti.

L'ureaplasma è spesso considerato associato al micoplasma. E questo non è un caso. Queste specie, come la clamidia, non sono classificate come virus o batteri, vivono all'interno delle cellule e appartengono a malattie sessualmente trasmissibili, sebbene anche la loro presenza in un corpo sano sia tutt'altro che rara. Quindi, per distinguere un portatore sano da una persona malata, sono necessari metodi speciali, in cui la PCR è considerata la più affidabile, poiché, a causa delle peculiarità della struttura e del comportamento di questi microrganismi, altri studi sono inefficaci.

Per quanto riguarda (tipo 1, 2) e, che appartiene anche ai virus dell'herpes (tipo 5), anche qui la situazione è ambigua. Il tasso di infezione della popolazione mondiale è vicino al 100%, quindi, in questo caso, l'identificazione del virus e della sua dose è molto importante, che svolge un ruolo soprattutto in gravidanza, perché per un adulto, un virus che ha messo radici in il suo corpo spesso non causa alcun disturbo e non dà segni di malattia.

Pertanto, un tale esame prescritto da un medico non dovrebbe essere ignorato, perché in alcuni casi la reazione a catena della polimerasi è un metodo obbligatorio e necessario di diagnostica di laboratorio che può proteggere non solo una donna, ma anche un piccolo uomo non ancora nato da gravi complicazioni.

In conclusione, vorrei sottolineare che un metodo così meraviglioso come la PCR è al servizio dell'umanità da più di 30 anni. Allo stesso tempo, i compiti del test non si limitano alla ricerca di agenti patogeni di malattie infettive. La reazione a catena della polimerasi, nata sulla base della biologia molecolare, è indissolubilmente legata alla genetica, è utilizzato con successo nella scienza forense per l'identificazione personale, in medicina legale per stabilire la paternità, in medicina veterinaria, se la clinica per animali ha la possibilità di acquistare attrezzature costose, così come in altri settori (industria, agricoltura, ecc.).

Video: PCR: l'essenza e l'applicazione