Ang isang paraan para sa paggamot sa sakit na dulot ng human immunodeficiency virus ay hindi pa natatagpuan. Ngunit ang mga diagnostic ay nakamit ang malubhang tagumpay. Ang pagsusuri sa HIV gamit ang paraan ng PCR ay isa sa mga opsyon para matukoy ang virus sa katawan.

Ang polymerase chain reaction, o PCR, ay isa sa makabagong pamamaraan Diagnosis ng HIV. Ito ay batay sa kakayahan ng mga nucleic acid na magparami ng kanilang mga sarili. Ang cell ng anumang buhay na organismo ay kinabibilangan ng protina at nucleic acid:

• RNA - ribonucleic acid,
• DNA - deoxyribonucleic acid.

Ang mga macromolecule na ito ay nag-iimbak ng genetic code. Kung ang konsentrasyon ng mga selulang viral sa dugo ay mababa, ang sample ay hindi naglalaman ng buong kadena ng DNA, ngunit ang kanilang mga indibidwal na "mga bloke ng gusali" - mga nucleotide. Nakikita ng polymerase chain reaction kahit na ang mga ganitong "fragment" ng mga viral cell. Pinapayagan ka nitong makuha ang resulta maagang yugto pagkatapos ng posibleng impeksyon, kapag ang mga unang klinikal na sintomas ay hindi pa lumitaw.

Ang pinakatumpak na resulta ay maaaring makuha gamit ang venous blood para sa pagsusuri. Ilang araw bago sumailalim sa pagsusulit. Itigil ang pag-inom ng mga immunostimulating na gamot 2 linggo bago.

Ang isang biomaterial sample ay hinuhukay sa isang medikal na laboratoryo reactor. Ang mga praksyon ay ginagamot sa pamamagitan ng mga enzyme. Ang mga reagents ay pinagsama sa DNA ng viral molecule at duplicate ito. Mula sa isang cell makakakuha ka ng 2, mula 2 - 4, pagkatapos ay 8. Ang bilang ay lumalaki nang husto. Ang chain reaction ay nagpapahintulot sa iyo na mabilis na madagdagan ang dami ng viral component at gawin itong nakikita ng mga laboratory technician.

Ang pamantayan ay negatibong resulta pagsusuri, na ganito ang hitsura: "Walang natukoy na DNA ng virus." Ito ang reference (statistical average) na halaga.

Mga kalamangan at disadvantages ng PCR technique para sa HIV

Ang pag-diagnose ng HIV gamit ang PCR ay may hindi maikakaila na mga pakinabang, ngunit mayroon ding mga makabuluhang disadvantages. Ang una ay kinabibilangan ng:

• Mataas na katumpakan. Ang posibilidad na makakuha ng mga maling negatibong resulta ay napakababa.
• Kagalingan sa maraming bagay. Hindi lamang dugo ang angkop para sa pananaliksik, kundi pati na rin ang iba pang mga biological fluid (vaginal discharge, semen). Ginagamit din ang laway at ihi, ngunit mas mababa ang katumpakan ng resulta. Sa mga kapaligirang ito, ang konsentrasyon ng mga viral cell ay hindi gaanong mahalaga.
• Malawak na hanay ng pagsusuri. Ang isang sample ng biomaterial ay maaaring masuri para sa ilang mga sakit.
• Bilis ng execution. Ang polymerase chain reaction ay isang agarang paraan ng diagnostic. Malalaman mo ang sagot sa susunod na araw.
• Ang kumpiyansa ay 80%. Gamit ang paraan ng PCR, ang mga viral particle ay maaaring makita, kahit na mababa ang kanilang konsentrasyon. Pinapayagan ka nitong masuri ang sakit sa mga unang yugto at simulan ang therapy sa isang napapanahong paraan.
• Maagang pagsusuri ng impeksyon sa HIV. Ang oras kung kailan natukoy ang HIV sa dugo gamit ang PCR ay 10-14 araw pagkatapos ng pinaghihinalaang impeksyon. Ito ang karaniwang haba para sa pag-diagnose ng immunodeficiency virus. sa yugtong ito ay hindi pa nakikita; ang paraan ng ELISA ay hindi gumagana.
• Walang mga paghihigpit sa edad. Ang pagsubok na ito ay maaaring isagawa sa isang bata mula sa sandali ng kapanganakan.

Mga disadvantages ng PCR method sa pag-diagnose ng HIV:

• Mas mataas na gastos kumpara sa 3rd generation enzyme immunoassay.
• Nangangailangan ng sopistikadong kagamitang medikal.
• Ang error ay 20% dahil sa mataas na sensitivity ng reaksyon. Para sa mga sakit na autoimmune, malignant na mga bukol, talamak mga impeksyon sa PCR kayang ibigay maling positibong resulta.

Sino ang nangangailangan ng PCR?

• Ang maagang pagtugon ay kailangan para sa paunang pagsusuri. Tinutulungan ng PCR na kumpirmahin o pabulaanan ang mga resulta ng ELISA.
• Nagbigay ng positibong resulta ang immunoblotting. Kung ang pagsusuri sa PCR ay unang isinasagawa, kung gayon ang pagkumpirma ng resulta sa pamamagitan ng immunoblotting ay sapilitan. Ang pananaliksik ay umaakma sa isa't isa. Gamit ang 2 pamamaraan nang sabay-sabay, inaalis ng mga doktor ang posibilidad ng mga pagkakamali.
• Kapag nakumpirma na ang positibo, tinutulungan ng PCR na subaybayan ang pagiging epektibo ng therapy.
• Ginagamit upang subukan ang dugo ng donor para sa presensya.
• Maaaring isagawa ang PCR kahit sa mga batang wala pang isang taong gulang. Ang pamamaraang ito ay ginagamit upang malaman ang HIV status ng mga bagong silang na ang mga ina ay mga carrier ng virus. Ang isang pagsubok na isinagawa sa mga unang araw ng buhay ay magpapakita kung naganap ang impeksyon sa intrauterine. Maaaring magkaroon ng impeksyon habang dumadaan ang sanggol sa birth canal. na nakuha ng sanggol sa panahon ng panganganak ay maaaring makilala pagkatapos ng 2 - 3 linggo.

Gaano katagal bago gumawa ng PCR test, at saan ko ito makukuha?

Ang pagsasagawa ng PCR test para sa HIV at pag-decipher ng mga resulta ay hindi nangangailangan ng maraming oras. Ang koleksyon ng dugo ay tumatagal ng 5-7 minuto. Sa karaniwang kaso, ang laboratory technician ay nangangailangan lamang ng 24 na oras upang ihanda ang sertipiko. Ang diagnosis ay tumatagal ng hindi hihigit sa 8 oras, ang natitirang oras ay kinakailangan para sa pagpaparehistro. Matatanggap ng pasyente ang ulat sa susunod na araw ng negosyo. gumanap sa loob ng 2 oras.

Ang pagsusuri sa HIV ay hindi isinasagawa gamit ang pamamaraang ito. sapilitang patakaran sa segurong medikal. Hindi mo matatanggap ang serbisyong ito nang libre sa isang pampublikong klinika. Ngunit halos lahat ng komersyal na laboratoryo ay karaniwang mayroon kinakailangang kagamitan at mga reagents. Ang pagsusuri sa PCR ay kadalasang kasama sa pangkalahatang pagsusuri sa HIV. Ang presyo ng mga kumplikadong diagnostic ay mula 600 hanggang 1000 rubles.

Maaari mong kumpletuhin ang pamamaraan nang hindi nagpapakilala. Sa pagtanggap, ang pasyente ay binibigyan ng isang indibidwal na numero kung saan malalaman niya ang resulta. Ipinapakita ng mga modernong sentrong medikal ang lahat ng data sa kanilang website sa personal na account ng kliyente.

Ang ilang mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik ay nasuri gamit ang mga pamamaraan ng ELISA at PCR.

Bilang paghahanda para sa pagsusuri, ang mga pasyente ay hindi pinapayuhan na kumain ng matatabang pagkain sa loob ng dalawang araw. Tulad ng pagsusuri sa dugo para sa mga virus, ang mga sample ay kinukuha nang walang laman ang tiyan ay hindi lalampas sa 8 oras ang nakalipas. Tanggalin ang mga pritong pagkain at alkohol sa iyong diyeta. Sa pamamagitan ng pagsunod sa mga simpleng kinakailangan na ito, gagawin mong mas malapit sa mas tumpak ang iyong mga resulta ng pagsusuri.

Ang listahan ng mga natukoy na sakit ay kinabibilangan ng:

• human papillomavirus (HPV);
• chlamydia;
• herpes (isang karagdagang pagsusuri ng dugo para sa herpes ay inireseta);
• ureaplasma;
• mycoplasma;
• gonorrhea;
• cytomegalovirus;
• trichomoniasis;
• toxoplasmosis.

PCR para sa HIV sa diagnosis ng impeksyon

Dahil sa ang katunayan na walang mga kilalang sintomas na katangian ng eksklusibo ng impeksyon sa HIV, batay lamang sa mga reklamo ng pasyente na nag-apply, hindi posible na makilala ang impeksyon sa HIV.

Ang pagsusuri sa HIV ay naging isang pangangailangan dahil... Ang kasalukuyang opinyon ng publiko tungkol sa sakit na ito ay ang AIDS ay itinuturing na isang parusang kamatayan. Mayroong mga kaso kung saan, pagkatapos ng hindi regular na pakikipagtalik, ang isang tao ay nagbabayad ng mas mataas na pansin sa mga signal ng kanyang katawan, paghahanap at madalas na nag-imbento ng mga bagong palatandaan ng isang nakamamatay na sakit.

Ang pagsasagawa ng pananaliksik sa mga kondisyon ng laboratoryo ay kasalukuyang ang tanging at pinaka-maaasahang diagnostic na opsyon (pagsusuri ng dugo para sa HIV). Ginagamit ang PCR upang matukoy ang mga sumusunod na problema sa kalusugan:

• upang kumpirmahin o pabulaanan ang pagkakaroon ng HIV sa panahon ng seronegative window;
• kung ang resulta ng immunoblot ay kaduda-dudang (upang itatag eksaktong paglalarawan proseso ng pathological);
• kapag nagtatatag ng genotype ng HIV-1 o HIV-2;
• upang itatag at subaybayan ang viral load ng katawan;
• upang matukoy ang katayuan ng HIV sa mga bagong silang na ang mga ina ay may HIV carrier;
• sa panahon ng pagsasalin ng dugo.

Ang kahusayan ng paraan ng PCR sa diagnosis Nakakahawang sakit:

Kapag ang isang positibong resulta para sa impeksyon sa HIV ay naitatag sa isang pasyente na humingi ng tulong medikal, nagsisimula silang magsagawa ng mas malalim na pag-aaral sa pasyente upang linawin at linawin ang likas na katangian ng sakit at ang kurso nito, pati na rin ang batayan at kalikasan ng mga pangalawang sakit, at ang antas ng pinsala sa kaligtasan sa sakit.

Mga pagsusuri sa ELISA at PCR: mga tampok ng pananaliksik, mga prinsipyo at interpretasyon

Ang dugo para sa pagsusuri ay kinuha mula sa isang ugat. Sa panahon ng pagbubuntis, ang mga sample ng dugo para sa AIDS ay mahigpit na kinukuha. Ang mga konklusyon tungkol sa kawalan o pagkakaroon ng immunodeficiency virus sa katawan ng pasyente ay ginawa batay sa pagkakaroon o kawalan ng mga antibodies. Ang ELISA ay hindi dapat isagawa kaagad pagkatapos ng pinaghihinalaang impeksyon, ngunit pagkatapos ng ilang oras upang mabuo ang mga antibodies sa dugo ng pasyente. Dumadaan iba't ibang dahilan mula 3 linggo hanggang 3 buwan.

Bilang karagdagan, ipinahayag na ang resulta ng ELISA ay maaaring parehong maling positibo at maling negatibo. Kapag nag-diagnose ng isang pinaghihinalaang impeksyon nang maaga, kapag ang mga antibodies sa HIV ay hindi pa lumitaw, isang maling negatibong resulta ang nakuha. Sa ganitong mga kaso, upang linawin, kailangan mong muling suriin ang dugo para sa HIV pagkatapos ng 1-3 buwan.

Ang isang maling positibong resulta, sa kabaligtaran, ay maaaring makuha kapag ang pasyente ay may mga talamak na impeksyon, kanser, mga sakit sa autoimmune bilang karagdagan sa itaas, ang mga paglihis mula sa pamantayan ay posible sa ibang mga sitwasyon. Samakatuwid, kung positibo ang resulta ng ELISA, tiyak na susuriin muli ito gamit ang mga pinakasensitibong pamamaraan.

Ang mga diagnostic ng PCR ay isa sa kasalukuyang pinaka-high-tech na pamamaraan ng pagsasagawa ng pananaliksik at kadalasang ginagamit sa pagtukoy ng mga nakakahawang sakit. Kasama sa mga diagnostic ng DNA ang ilang iba't ibang paraan ng pagsasagawa ng pananaliksik ang pinakasikat na paraan ngayon ay ang polymerase chain reaction, o PCR.

Ang pamamaraang ito ay batay sa paghahanap ng isang maliit na bahagi ng DNA ng causative agent ng isang naibigay na impeksyon sa mga tisyu para sa microstudy. Sa kasong ito, ang isang maliit na bahagi ng DNA ay naglalaman ng hanggang ilang daang pares ng DNA, na nasa mahigpit na pagkakasunud-sunod.

Ang paraan ng PCR ay ang pinakatumpak na magagamit upang matukoy ang pagkakaroon ng isang virus, hindi alintana kung lumitaw ang mga antibodies o hindi. Ngunit, sa kabila ng katumpakan nito, ang pamamaraan ay may isang malubhang disbentaha, na tiyak na sanhi ng pagtaas ng katumpakan nito. Mayroong medyo mataas na posibilidad na ang resulta ay mali. Samakatuwid, may kaugnayan sa pamamaraang ito at bilang karagdagan dito, ang iba pang mga pamamaraan ay ginagamit upang makita ang mga genetic at antigenic na materyales.

Ang kakanyahan ng pag-diagnose ng hepatitis gamit ang PCR

Mayroong limang napatunayang virus na nagdudulot ng sakit sa atay. Ito ang mga kilalang hepatitis virus A, B, C, D, E. Napakabihirang mga kaso kapag ang hepatitis ay sanhi ng Epstein-Barr virus, na talagang isang uri ng herpes. Ang mga nakalistang virus ay mga kinatawan ng iba't ibang pamilya, na nakakaapekto sa kanilang paggamot depende sa uri ng hepatitis.

Ang isa sa mga pinaka-tumpak at maaasahang pamamaraan ng molecular genetic diagnostics ay PCR, iyon ay, polymerase chain reaction. Ginagawang posible ng pamamaraang ito na masuri ang iba't ibang uri ng namamana at nakakahawang sakit sa isang pasyente.

Pinapayagan ka ng pananaliksik sa PCR na masuri ang isa sa mga kumplikadong sakit tulad ng, na mahirap gamutin. Ang pagiging maaasahan ng HIV PCR ay nabibigyang katwiran lamang sa 80 kaso sa 100.

Ang pangunahing paraan upang masuri ang impeksyon sa HIV sa katawan ng isang tao ay sa pamamagitan ng kanyang dugo, iyon ay, ang pagsusuri para sa sakit na ito ay isinasagawa. Ang pinakasimpleng at pinakakaraniwang paraan ng diagnostic ay ang pagkuha ng venous blood at isagawa ito sa isang espesyal na laboratoryo. Siyempre, ang positibong resulta na nakuha ay maaaring mali, kaya ito ay muling sinusuri sa isang mas tumpak na paraan ng pananaliksik sa isang reference na laboratoryo.

Ang polymerase chain reaction ay itinuturing na medyo mahal na pamamaraan, at ang pagpapatupad nito ay nangangailangan ng mga espesyal na kagamitan at mataas na kwalipikadong mga espesyalista. Ito ang dahilan kung bakit hindi ito naging laganap sa populasyon.

Ang paggamit ng pagsusuri sa PCR upang masuri ang HIV ay nagbibigay-daan sa iyo upang makakuha ng tumpak at maaasahang resulta tungkol sa pagkakaroon ng sakit, gayunpaman, ito ay madalas na nakasalalay sa paghahanda ng pasyente mismo.

Ang pagsusuri sa PCR ay isinasagawa sa mga sumusunod na kaso:

1. Diagnosis ng impeksyon sa HIV sa mga bagong silang na ipinanganak mula sa isang ina na nahawaan ng AIDS.
2. Upang makontrol ang konsentrasyon ng HIV sa dugo ng pasyente
3. Pagsusuri ng dugo ng donor.

Kahit na ang pagsusuri sa PCR ay nagpapakita ng isang positibong resulta, ang isang pagsusuri ay hindi maaaring gawin gamit ang pagsusulit na ito lamang. Kadalasan ito ay ginagamit bilang karagdagang pamamaraan upang malutas ang mga hindi pagkakaunawaan.

Ang pagsusuri sa PCR, sa kasamaang-palad, ay hindi matatawag na isang unibersal na pamamaraan, ang pagpapatupad nito ay nagbibigay ng tumpak na mga resulta para sa pagkakaroon o kawalan ng impeksiyon sa katawan ng tao. Ito ay dahil sa ang katunayan na ang ganitong uri ng pananaliksik ay mas malamang kaysa sa iba pang mga pamamaraan upang makagawa ng mga maling positibong resulta. Ginagamit ang pamamaraang diagnostic na ito kapag nag-diagnose ng isang sakit o pagsusuri para sa impeksyon sa HIV. Ito ay pangunahing ginagamit bilang pantulong na paraan para sa pag-diagnose ng AIDS virus.

Gayunpaman, sa kabila ng posibilidad ng isang maling-positibong resulta, ang naturang pagsusuri sa HIV ay may ilang mga pakinabang sa iba pang mga pamamaraan ng diagnostic. Ang pagsusuri sa PCR ay maaaring isagawa nang maaga sa 11-15 araw pagkatapos ng petsa ng pinaghihinalaang impeksyon, at lahat ng iba pang mga pamamaraan ay ginagawang posible upang masuri ang pagkakaroon ng virus ng AIDS sa katawan ng tao pagkatapos lamang ng mahabang panahon. Ang pagkakaibang ito ay ipinaliwanag sa pamamagitan ng katotohanan na ang karamihan sa mga pagsusuri sa HIV screening ay batay sa pagtuklas ng virus, na ang pagbuo nito ay nangyayari sa loob ng tatlong buwan.

Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng pagsusuri sa PCR at iba pang mga diagnostic na pamamaraan ay ang katotohanan na hindi nito nakikita ang virus, ngunit ang pagkakaroon ng virus mismo sa katawan ng pasyente.

Ito ay para sa kadahilanang ito na ang paraan ng polymer chain reaction ay matatawag na perpekto kung may pangangailangan para sa maagang pagtuklas. Bilang karagdagan, ang pamamaraang ito ay maaaring gamitin sa mga kaso kung saan ang pagkakaroon ng mga antibodies ay hindi maaaring maging isang maaasahang tagapagpahiwatig.

Higit pang impormasyon tungkol sa HIV testing ay makikita sa video.

Kung kinakailangan upang matukoy ang antas o kalubhaan ng patolohiya sa katawan ng tao, ginagamit nila ang pagsasagawa ng isang quantitative PCR study. Ito ay nagbibigay-daan sa iyo upang makakuha ng impormasyon tungkol sa antas ng konsentrasyon ng impeksyon sa katawan ng pasyente. Ang pag-unlad ng sakit ay sinamahan ng unti-unting pagtaas sa konsentrasyon ng virus, at ginagawang posible ng quantitative PCR diagnostics upang matukoy ang yugto ng impeksyon at ang pagiging epektibo ng paggamot. Ang pag-diagnose ng "viral load" bago matukoy ang sakit at pagkatapos ng paggamot ay nagbibigay-daan sa amin upang makagawa ng konklusyon tungkol sa kung gaano kabisa ang paggamot.

Iba pang mga pamamaraan ng diagnostic ng HIV

Ngayon, ang pag-diagnose ng impeksyon sa HIV ay isang karaniwang pamamaraan na kinabibilangan ng paggamit ng iba't ibang uri mga diagnostic:

Mga sistema ng pagsubok ng ELISA

Ang pagsasagawa ng naturang screening test ay ginagawang posible na matukoy ang virus sa loob ng ilang linggo pagkatapos nitong makapasok sa katawan ng tao. Ang nasabing pag-aaral ay hindi naglalayong matukoy ang pagkakaroon ng virus sa pasyente, ngunit sa pag-diagnose ng paggawa ng mga antibodies dito. Mayroong ilang mga henerasyon ng mga pagsubok sa ELISA, na ang bawat isa ay may iba't ibang sensitivity. Ang ganitong pagsubok ay minsan ay nagbibigay ng mga resulta, na ipinaliwanag sa pamamagitan ng hindi tamang pagproseso at pagkakaroon ng iba't ibang uri ng mga pathologies sa katawan ng pasyente.

Immune blotting

Kung ang immune blotting ay nagpapakita ng positibong resulta, maaari nating pag-usapan ang tungkol sa paggawa ng panghuling pagsusuri sa HIV. Ang pangunahing paraan upang maisakatuparan ito ay ang paggamit ng isang nirocellulose strip kung saan inilalapat ang mga protina ng pinagmulan ng viral.

Mga paraan ng pagpapahayag

Ito ay itinuturing na isang bago sa larangan ng pag-diagnose ng impeksyon sa HIV at ang mga resulta ay maaaring masuri sa loob ng ilang minuto pagkatapos na maisagawa ang mga ito. Ang pinaka-tumpak at maaasahang mga resulta ay nakuha sa pamamagitan ng mga pagsusuri sa immunochromatographic, ang paggamit nito ay batay sa prinsipyo ng daloy ng maliliit na ugat.

Maaari nating pag-usapan ang pagkakaroon ng impeksyon sa HIV sa katawan pagkatapos lamang makumpirma ang mga pagsusuri sa ELISA na may pagsusuri sa IB.

Ang pag-diagnose ng impeksyon sa HIV sa katawan ng tao ay nagpapakilala makabuluhang pagbabago sa kanyang karaniwang paraan ng pamumuhay at pakikipag-ugnayan sa iba. Responsibilidad ng mga medikal na kawani na i-save ang mga resulta ng pagsusuri, at ang pasyente lamang mismo ang magpapasya kung sino ang dapat ipaalam tungkol sa kanyang sakit. Ang PCR ay isa sa mga diagnostic na pamamaraan na nagpapahintulot sa isa na matukoy ang pagkakaroon ng virus sa katawan ng tao sa loob lamang ng ilang linggo.

Ayon sa istatistika ng WHO, higit sa 40 mga nakaraang taon 25 milyong tao ang namatay dahil sa AIDS. Napakalaki ng pinsalang dulot ng impeksyong ito. Karamihan sa mga nahawahan ay nasa mga bansa sa Africa, kung saan nagmula ang impeksyong ito. Sa HIV, ang pag-diagnose ng sakit ay nagiging lalong mahalaga. Totoo, wala pang paraan ng paggamot sa HIV, ngunit ang maagang therapy ay maaaring pahabain ang buhay ng pasyente at mapabuti ang kalidad nito.

Diagnosis ng impeksyon sa HIV

Ang impeksyon sa HIV ay tinutukoy ng iba't ibang yugto gamit ang mga sumusunod na pamamaraan:

• ELISA - enzyme immunoassay.
• Western blot.
• PCR - polymerase chain reaction.
• Express tests.

Ang paraan ng PCR ay binuo ng American biochemist na si Kary Mullis, na nakatanggap ng premyo para dito noong 1983 Nobel Prize. Ngayon, ang pamamaraang ito sa gamot para sa pag-diagnose ng lahat ng mga impeksyon ay itinuturing na nangungunang isa dahil sa katumpakan at nilalaman ng impormasyon nito. Ang HIV ay walang pagbubukod sa bagay na ito.

Ang kakanyahan ng pagsusuri

Ang bawat buhay na selula ay naglalaman ng RNA at DNA. Ang mga nucleic acid na ito ay may kakayahang kopyahin ang sarili at pagpaparami ng sarili. Ang bawat impeksyon ay may natatanging mga fragment ng DNA. Ang mga fragment ng nucleic acid na ito ay umiikot sa mga biological fluid. Ang mga ito ay nakuha at kinikilala ng mga espesyal na kagamitan - isang reaktor. Ito ang batayan ng pamamaraan. Binibilang ng laboratory assistant ang mga fragment na ito. Ang RNA ng HIV retrovirus ay sinusubaybayan. Kahit na may mga solong kopya ng mga viral particle, maaaring makita at mabilang ng PCR ang mga ito.

Ang venous blood ay kadalasang ginagamit bilang test fluid. Ang mga espesyal na bahagi ng pamamaraan ay nakikipag-ugnayan sa mga particle ng virus at ginagawa itong nakikita, dahil ang mga natagpuang mga fragment ay pinarami.

Sa kaso ng HIV, ang resulta ng pagkakaroon ng virus ay maaaring makuha bago pa man lumitaw ang isang klinika. Samakatuwid, dahil sa mataas na sensitivity nito, ang PCR ay may napakataas na halaga ng diagnostic. Ang isang malaking bentahe ng PCR ay ang versatility ng pamamaraan. Tagal ng incubation Ang mga impeksyon ay hindi hadlang para sa PCR.

Gastos ng pag-aaral

Ang paraan ng PCR ay medyo mahal. Isa ito sa malaking disadvantage nito. Upang maisakatuparan ito, kailangan mo ng pinakabagong kagamitan at mataas na kwalipikadong doktor sa laboratoryo. Dahil sa nabanggit, ang PCR diagnostics ay hindi ginagawa sa maliit mga populated na lugar. Maaari ka lamang magpasuri sa mga dalubhasang malalaking klinika.

Ang halaga ng pagtukoy ng HIV DNA sa mga klinika sa Moscow ay nagsisimula mula sa 2,800 rubles, pagtukoy ng viral load gamit ang PCR (viral RNA sa plasma) - mula sa 8,800 rubles, at HIV resistance sa protease inhibitors - mula sa 16,500 rubles. Tulad ng nakikita mo, ang mga presyo ay medyo mataas. Maaaring isagawa ang PCR nang walang bayad sa mga pampublikong klinika sa ilalim ng sapilitang patakaran sa segurong medikal. Mahalaga na ang pamamaraan ay maaaring gawin nang hindi nagpapakilala. Sa pagtanggap, ang pasyente ay tumatanggap ng isang numero kung saan maaari niyang malaman ang resulta. Ang mga modernong sentrong medikal ay mayroon mga personal na account mga kliyente kung saan ilalagay ang data na ito.

Mga layunin ng pag-aaral

Ang mga diagnostic ng PCR para sa HIV ay inireseta sa mga sumusunod na kaso:

• Ang pagtuklas ng impeksyon sa isang bata na ipinanganak mula sa isang maysakit na ina o carrier upang matukoy ang intrauterine infection.
• Kung ang ELISA ay nagbigay ng mga kaduda-dudang resulta (HIV PCR ay tumutulong sa kasong ito upang makagawa ng panghuling pagsusuri).
• Upang matukoy ang dami ng nilalaman ng virus sa katawan.
• Kung positibo ang immunoblotting, sila at ang PCR ay nagpupuno sa isa't isa.
• Pagsusuri ng donor.
• Para sa maagang pagsusuri ng HIV.
• Upang matukoy ang pagiging epektibo at paglaban sa ART.

Ang bentahe ng pagsusuring ito ay ang HIV PCR ay maaaring gawin kahit sa mga batang wala pang isang taong gulang.

Ang pag-aaral ay madalas na ginagawa hindi para sa pangunahing pagsusuri, ngunit sa panahon ng proseso ng paggamot. Ang pangunahing diyagnosis ay serological test (tinutukoy nila ang antas ng antibodies sa HIV). Sa kaso ng isang maling positibong resulta, ito ay paulit-ulit - ito ay maaaring kapag ang viral load ay mababa.

Ang PCR ay nag-diagnose ng HIV kapag wala pang antibodies dito. Ang pamamaraan ng ELISA sa kasong ito ay hindi magbibigay ng sagot.

At ang PCR test para sa HIV ay magiging positibo na. Ngunit ang mga sintomas ng panahong ito ng HIV ay hindi tiyak. Ang pasyente ay unang sumasailalim sa mahaba at hindi matagumpay na paggamot para sa ARVI mula sa isang pangkalahatang practitioner. Dapat tandaan na ang diagnosis ng HIV ay hindi maaaring gawin lamang sa batayan ng PCR ay kinakailangan din. Ang paraan ng PCR ay kadalasang nagsisilbing pantulong na pamamaraan para sa mga kumplikadong kaso.

Paghahanda para sa pagsusuri

Bago kumuha ng PCR test para sa HIV, 2 araw bago ang pagsusuri kailangan mong iwasan ang pagkain ng matatabang pagkain at alkohol. Mas mainam din na huwag pilitin ang iyong sarili sa mental at pisikal. Kung ang pasyente ay inireseta ng isang kurso ng immunostimulation, ito ay itinigil 2 linggo bago ang pagsubok.

Mas mainam na mag-donate ng dugo sa umaga. Maaari mo ring suriin ang iba pang mga biological fluid ng katawan (sperm, vaginal secretions), ngunit ang pinakamahusay na materyal ay dugo. Ang laway, pawis, ihi at luha ay hindi ginagamit, dahil ang nilalaman ng virus sa mga ito ay minimal.

Mga Bentahe ng PCR para sa HIV

Ang mga bentahe ng pamamaraan ay ang napakababang posibilidad ng isang maling positibong resulta, ang pagiging pangkalahatan ng reaksyon para sa anumang biological na likido ng katawan. Ang pagsusuri ay may malawak na hanay:

• Maaaring gamitin ang isang solong pagbunot ng dugo upang makita ang iba't ibang mga impeksiyon.
• Ang pamamaraan ay kagyat, ang resulta ay handa na sa susunod na araw.
• Ang kumpiyansa ay mula 85 hanggang 98%.
• Ang pagkakaroon ng HIV ay maaaring matukoy 10-14 araw pagkatapos ng impeksyon (ang mga antibodies ay hindi pa magagamit sa oras na ito).
• Walang mga paghihigpit sa edad, maaari itong isagawa kaagad mula sa sandali ng kapanganakan.

Mga disadvantages ng pamamaraan

Ang mga disadvantages ng PCR ay ang mga sumusunod:

• Ang gastos ng pagsusuri.
• Kailangan ang sopistikadong kagamitang medikal.
• Ang isang mataas na kwalipikadong laboratoryo technician at doktor na kumukuha ng pagsusuri ay kinakailangan.
• Ang reaksyon ay lubhang sensitibo, kaya ang error ay maaaring 20%.
• Ang isang maling positibong resulta ay maaaring mangyari kung ang pasyente ay may mga proseso ng autoimmune, oncology, o mga malalang impeksiyon.
• Ang espesyal na kalinisan ng mga lugar ng laboratoryo ay kinakailangan, dahil ang virus ay maaaring pumasok sa pagsusuri mula sa hangin. Pagkatapos ay magiging mali ang resulta.

Para sa mga laboratoryo kung saan isinasagawa ang PCR, upang mapabuti ang kalidad ng mga diagnostic, ang mga espesyal na mahigpit na hakbang ay binuo ayon sa sistema ng SanPiN para sa panloob na kontrol. Bilang karagdagan, ang lahat ng mga patakaran sa pagpapatakbo ay dapat sundin gamit ang pamamaraang ito:

• Dapat mong mahigpit na sundin ang impormasyon sa mga test tube.
• Bago kumuha ng dugo, tingnan muli at siguraduhin na ang pagsusuri ay inireseta.
• Dapat lagyan ng label nang tama ng nars ang mga tubo.
• Ang doktor sa laboratoryo ay dapat na isagawa nang tama ang lahat ng mga manipulasyon sa biomaterial upang maiwasan ang cross-contamination.
• Ang sistema ng pagsubok ay dapat na may mahusay na kalidad.

Kung matutugunan lamang ang lahat ng kundisyong ito, ang error sa sagot ay maaari lamang humigit-kumulang 2% ng mga episode.

Tagal ng pagsusuri

Maraming tao ang interesado sa kung gaano katagal bago maging handa ang HIV PCR test. Ang diagnosis ay tumatagal ng hindi hihigit sa 8 oras. Ang pasyente ay maaaring makatanggap ng sagot sa mismong susunod na araw. Isinasagawa ang express testing sa loob ng 2 oras.

Pagiging maaasahan ng PCR

Sa kabila ng maraming mga pakinabang, ang PCR ay hindi itinuturing na isang perpektong paraan ng diagnostic. Ang mga tao ay bumaling sa kanya kung kinakailangan upang makakuha ng mga pagsusuri sa screening para sa pagkakaroon ng HIV sa katawan.

Kailan kinukuha ang dugo para sa pagsusuri?

Gaano katagal bago kumuha ng PCR test para sa HIV? Ang isang maaasahang resulta ay maaaring makuha sa pamamagitan ng pagkuha ng dugo 4-4 na araw pagkatapos ng pinaghihinalaang impeksyon. Pagkatapos ng 2 linggo, ang katumpakan para sa HIV ay magiging 98%, at pagkatapos ng 5 araw - 80%. Ang pagkakaroon ng mga resulta ng PCR ay magiging maaasahan, ngunit para sa isang ganap na tumpak na resulta, isinasagawa din ang ELISA.

Magiging epektibo lamang ang isang pagsusuri sa ELISA kung mayroong mga antibodies sa virus. Dahil ang ELISA ay nagbibigay ng mas mataas na posibilidad (98%-99.9%), ang PCR ay hindi matatawag na 100% confirmatory test para sa pagkakaroon ng HIV infection. Ngunit ito ang tanging paraan kung saan hindi mo kailangang maghintay para lumitaw ang mga antibodies.

Para sa HIV, ang paraan ng PCR ay maaaring magbigay ng impormasyon tungkol sa bisa ng ART, ang yugto ng sakit sa HIV at ang dami ng VL (isang quantitative assessment ng pagkakaroon ng HIV sa katawan). Ito ay magsasaad ng kalubhaan at lawak ng mga pagbabago.

Kinakailangan din na kumuha ng mga pagsusuri sa PCR para sa HIV kung mayroong mga antibodies sa dugo, ngunit ang kanilang presensya ay hindi nagpapahiwatig ng klinikal na katiyakan ng impeksyon sa HIV.

Ang mga pagsusuri ay kinukuha hindi lamang sa mga kaso ng impeksyon at kaswal na pakikipagtalik. Iba pang mga dahilan:

• Pagpaplano ng pagbubuntis.
• Paparating na operasyon.
• Kaswal na pakikipagtalik.
• Ang ilang mga propesyon ay nangangailangan ng pagsusulit na ito na payagang magtrabaho (mga guro, doktor at iba pang medikal na tauhan).
• Mga bilanggo.
• mga pasyente ng TB.
• Mga serbisyong pang-emerhensiya at mga manggagawang pulis.
• Ang mga babalik pagkatapos ng bakasyon mula sa mga kakaibang bansa (kung nais, siguraduhing walang impeksyon).
• Mga puta.
• Mga dayuhang estudyante.
• Mga adik sa droga.

Gayundin, ang ilang mga sintomas sa isang pasyente ay maaaring pilitin kang magpa-HIV test:

• Biglang pagbaba ng timbang.
• Pagtatae na tumatagal ng higit sa 3 linggo.
• Hindi makatwirang pagtaas ng temperatura sa loob ng mahabang panahon.
• Pinalaki ang mga lymph node.
• Hindi maipaliwanag na sanhi ng pneumonia, candidiasis, atbp.

Ang pag-decode ng pagsusuri ay ang prerogative ng dumadating na manggagamot, hindi ng laboratory assistant.

PCR o ELISA, alin ang mas maganda?

Kapag ang RNA ng virus ay nakita sa parehong qualitatively at quantitatively. Malinaw na kinikilala ng assay na ito ang isang partikular na pathogen kahit na mayroong maraming mga cross-reacting na pathogen. Maaaring gamitin ang biological na materyal kahit na sa tuyo na anyo. Ang downside ay ang mataas na sensitivity ng PCR, kapag ang isang maling positibong resulta ay maaaring sanhi ng pagkakaroon ng kahit isang maliit na halaga ng dayuhang DNA sa mga instrumento o test tube.

Ang gawain at posibilidad ng ELISA ay upang matukoy ang pagkakaroon ng mga antibodies sa isang retrovirus. Bagama't 99% ang katumpakan nito, hindi ito naaangkop sa mga unang yugto.

Qualitative HIV test

Ang pagsasagawa ng mataas na kalidad na PCR para sa HIV ay tumutukoy sa pagkakaroon ng virus sa katawan. Ang mga resulta sa kasong ito ay magiging ganito: positibo, maling positibo, negatibo. Ngunit ang pag-aaral na ito ay hindi magbibigay ng impormasyon tungkol sa dami ng retrovirus. Ang ganitong qualitative analysis ay hindi praktikal kapag ang HIV infection ay nakita na sa katawan sa pamamagitan ng ibang paraan.

Imposibleng kontrolin ang pagiging epektibo ng paggamot na may mataas na kalidad na PCR.

Quantitative HIV test

Isinasagawa lamang ito para sa mga taong nahawaan ng HIV upang mabilang ang bilang ng mga kopya ng RNA ng virus sa isang biological na produkto.

Ang layunin ng naturang pag-aaral ay subaybayan ang paggamot at tukuyin ang paglaban ng virus dito. Ang antiviral therapy sa naturang mga kalkulasyon ay hindi inireseta ng doktor nang walang taros, at samakatuwid ay magiging mas epektibo. Ang quantitative PCR para sa impeksyon sa HIV ay ginagawa nang mas madalas. Ang pagsusuri na ito ay ipinapakita sa mga kopya/ml ng dugo.

Anong mga resulta ang maaaring ibigay:

• Walang viral RNA o napakaliit nito (mga 20 kopya/ml). Walang katiyakan ng diagnosis.
• Mula 20 hanggang 10 hanggang 6 degrees na mga kopya/ml - maaasahan ang diagnosis.
• Higit sa 10 hanggang 6 na kopya/ml - malaking VL.

Ang mga laboratoryo ay maaaring magsagawa ng real-time na pagsusuri sa HIV PCR. Ito ay nagpapahiwatig ng pagmamasid at numerical na pagtatasa ng akumulasyon ng mga produkto ng PCR habang awtomatikong itinatala ang mga resulta.

Na tayo ay niloko ng HIV/AIDS sa loob ng 30 taon ay isang medikal na katotohanan na hindi na nangangailangan ng anumang patunay. Ayokong makasakit ng damdamin ng sinuman, ngunit ang katotohanan ay sa ngayon, na nasa harap ko ang lahat ng magagamit na impormasyon tungkol sa alternatibong punto ng pananaw, iyon ay, ipinakita ng mga dissidents ng HIV, imposibleng magpatuloy at walang muwang. naniniwala sa isang artipisyal na nilikha at ipinataw sa tulong ng mapang-uyam at mapanlinlang na propaganda ng HIV/AIDS theory.

Kung ipinahayag mo ang iyong pagkalito tungkol sa katotohanan na ang mga diagnostic test para sa HIV ay hindi nakakakita ng virus mismo, ngunit ang mga antibodies lamang dito, at ito ay nalalapat hindi lamang sa enzyme-linked immunosorbent assay, kundi pati na rin sa immunoblotting, na itinuturing na mas tumpak, kung gayon malamang narinig mo ang mga katiyakan ng mga doktor o ilang mga taong may kaalaman na mayroong polymerase chain reaction method na walang kinalaman sa antibodies, ngunit direktang nakakakita ng virus mismo.
Narinig mo na ba ang tungkol sa paraan ng diagnostic ng PCR, at sa partikular na impeksyon sa HIV? Sigurado. Nasubukan mo na bang alamin ito ng kaunti at alamin ito? Hindi? So malinaw na niloloko tayo? ayos lang. Ngunit ngayon ay ipapakita ko ito nang malinaw, sa aking mga daliri...

Oo, tayo ay talagang tahasan at mapang-uyam na naloloko kapag tinitiyak nila sa atin na ang PCR test para sa HIV ay tumutukoy sa pagkakaroon ng virus mismo o ang konsentrasyon nito sa dugo, iyon ay, ang viral load. At sasabihin ko kaagad na sa bagay na ito ang paraan ng PCR ay hindi lamang naiiba sa ELISA at IB, ngunit masasabi ng isa na ito ay direktang batay sa eksaktong parehong prinsipyo.
Ano ang ibig sabihin nito? Paalalahanan ko kayo na ang diagnostic HIV test na ELISA at Immunoblot ay batay sa reaksyon ng mga antibodies sa sample ng pagsubok na may mga antigen ng virus na inilagay sa mismong pagsubok. Ano ang nasa mga sistema ng pagsubok bilang mga protina ng HIV na ito - ang Diyos lamang ang nakakaalam, at malamang na hindi lahat. Alinsunod dito, ganap na hindi malinaw kung aling mga antibodies ang tumutugon sa mga dapat na protinang ito ng HIV, na nagreresulta sa isang 62-item na listahan ng mga sakit at kundisyon na nagdudulot ng maling positibong reaksyon.

Ano ang batayan ng paraan ng polymerase chain reaction, at paano ito nasuri para sa mga nakakahawang sakit? Sa kaso ng hepatitis at HIV, ang dugo ng pasyente ay sinusuri. Upang maitaguyod ang pagkakaroon ng isang tiyak na pathogen sa sample ng dugo sa ilalim ng pag-aaral, ang isang panimulang aklat ay ginagamit para sa pagsusuri sa PCR, iyon ay, isang fragment ng DNA ng pathogen mismo, na pantulong sa isang partikular na seksyon ng DNA nito, iyon ay, sa esensya, ang Ang panimulang aklat ay nakakabit sa isang seksyon ng DNA sa parehong paraan tulad ng mga seksyon na konektado sa isa't isa DNA double helix.
Nakuha mo ba? Ang iyong dugo ay kinuha, pagkatapos ay isang bagay na idinagdag dito na parang walang alinlangan na isang natatanging bahagi ng HIV virus genome, iba pang mga kinakailangang sangkap ay idinagdag, pagkatapos ang buong bagay ay pinainit at pinalamig ng tatlumpung beses, at ang resulta ay voila! HIV positive ka! ang iyong viral load ay 3 milyon! simulan agad ang therapy!

Ngunit sandali. Hindi mo ba nakikita kung paano ka naloko sa simula pa lang?
Natitiyak mo na ang paraan ng PCR ay nakakakita ng virus mismo. Pero ito ganap na kasinungalingan! Ang paraan ng PCR sa bagay na ito ay hindi naiiba sa ELISA at IB! Kung paanong ang mga hindi kilalang bagay ay ginagamit sa mga sistema ng pagsubok sa ilalim ng pagkukunwari ng mga antigen ng HIV, gayon din sa mga pagsusuri sa PCR, sa ilalim ng pagkukunwari ng mga panimulang aklat na ipinasa bilang bahagi ng DNA ng HIV mismo, ang isang ganap na hindi kilalang sangkap ay ginagamit sa parehong paraan. Nauunawaan mo na kung walang HIV, kung gayon walang pag-uusapan tungkol sa anumang HIV DNA, o HIV RNA, o mga antibodies sa HIV, lalo na sa mga ina, kung saan sinisiraan nila ang ating mga utak, na sinasabi sa atin na lahat ng mga bata mula sa HIV-positive. mga ina, at nawawala nang mag-isa sa ikalawang taon ng buhay...

Ganito.
- Ang paraan ng PCR ay nakakakita ng HIV virus mismo, walang mga pagkakamali o pagdududa dito! At ang pinakatumpak na paraan na ito ay nagpapakita ng viral load, na napakahalaga para sa pagsubaybay sa dynamics ng sakit at paggamot nito!
- Well, well... Pinag-uusapan mo ba ang virus mismo? Ano ang ginagamit bilang panimulang aklat? Ang parehong virus? Ang parehong natuklasan nina Montagnier at Gallo 30 taon na ang nakakaraan? Talaga bang nahanap nila siya? Naglinis talaga? Nagpakuha ka ba talaga ng litrato? Talaga bang napatunayan na ito ay gumagamit ng T-lymphocytes para sa pagtitiklop/pagpaparami, bilang resulta kung saan ang kanilang kabuuang bilang ay naubos at ang mapanganib na immunodeficiency ay nangyayari? Totoo ba ang lahat ng ito?

At sa esensya, ang paraan ng PCR sa AIDS ay ginagamit hindi dahil sa imbentor nito na si Kary Mullis (sa halip na salungat sa kanyang opinyon!), ngunit salamat kina Montagna at Gallo, na naglabas ng HIV mula sa manipis na hangin, at kung saan ang mga primer ng DNA ay ginagamit sa PCR diagnostics ng HIV...

Kaya eto na. Kung sinabihan ka na, base sa resulta ng PCR testing, ikaw ay HIV-positive at mayroon kang mataas na viral load, o pinag-uusapan natin ang tungkol sa iyong anak, huwag mag-alala kahit isang segundo! tahasan kang niloloko! Ang imbentor ng polymerase chain reaction method, ang microbiologist na si Kary Mullis, ay isang HIV dissident, at siya ay tiyak na laban sa paggamit ng PCR sa HIV diagnosis, dahil naiintindihan niya na sa kaso ng isang hindi umiiral na HIV virus, ito ay simple. isang lantad, mapang-uyam na panlilinlang...

Isang sandali pa. Narinig mo na ba ang tungkol sa undetectable viral load? Ang katotohanan ay hindi lahat ng HIV-positive na tao, kapag sinuri para sa dami ng virus sa kanilang dugo, ay nakakakuha ng isang tiyak na resulta, na, depende sa halaga, ay itinuturing na mababa o mataas na viral load. Kung kakaunti lang ang mga ganoong tao, hindi na sila pag-uusapan. Ngunit ang katotohanan ay tila marami sa kanila, at iyon ang dahilan kung bakit pinag-uusapan nila ang tungkol sa isang hindi matukoy na viral load sa impeksyon sa HIV. Hindi ko na babanggitin ang PR therapy na diumano ay nagpapababa ng VL sa hindi matukoy. Hindi, ang katotohanan ng bagay ay na walang anumang therapy, sa maraming mga tao ay hindi ito nakita. Hindi kailanman.
Iyon ay, ang pasyente ay na-diagnose na may HIV infection, ngunit gamit ang sikat na ultra-sensitive, space-precise PCR diagnostic method, imposibleng mahanap ang HIV virus sa kanyang katawan. Paano kaya?

At pagkatapos ay sinabi sa amin na ang pamamaraan ay, siyempre, natatangi, ngunit ang mga modernong teknikal na paraan ay nagpapataw pa rin ng mga limitasyon, at ang pinaka-maaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaoras ay hindi matukoy gamit ang PCR diagnostics.

Iyon ay, ang pasyente ay walang alinlangan na may HIV. Ang virus ay walang lunas, hindi masisira, tuso, mapanlinlang, malisyoso, sobrang matalino at mapag-imbento. At kahit na ang super-magic na PCR method ay hindi matukoy kung saan nagtatago ang tusong virus mula sa mga siyentipiko at doktor.
Lumalabas na, sa isang banda, sinasabi nila sa amin kung ano ang isang kahanga-hanga at napakatumpak na paraan ng PCR, maaari nitong hulaan ang isang buong elepante at kahit isang balyena mula sa isang molekula - at sa kabilang banda, habang ang kanilang mga mata ay lumulutang, sila ay bumubulong. hindi malinaw ang tungkol sa hindi matukoy na viral load sa libu-libong mga pasyente na nabubuhay nang mga dekada nang may diagnosis ng impeksyon sa HIV at hindi kumukuha ng antiretroviral na paggamot.

Kaya ito napupunta. Niloloko nila tayo sa gusto nila. Huwag maging walang takot idiots. Huwag kunin ang salita ng sinumang doktor o siyentipiko. Sasabihin nila sa iyo ng tatlong beses ng pitong beses ang tungkol sa katumpakan ng kosmiko ng mga pagsusuri sa PCR, ngunit ang isang pangungusap lamang tungkol sa mga primer ng HIV na ginamit sa kasong ito ay agad na durog sa buong kahanga-hangang larawan. Dahil para masaya, masasabi natin na tulad ng pag-patent ni Gallo sa unang mga pagsusuri sa HIV nang matuklasan niya ang isang pekeng HIV virus, sa parehong paraan na maaari niyang patentehin ang mga HIV primer para sa PCR diagnostics ng HIV infection, dahil ang mga primer ay parehong bagay, na Ang HIV antigens ay ilang partikular na biological substance na likas lamang sa virus na ito (genome fragment o partikular na protina)...