Cilvēka imūndeficīta vīrusa izraisītās slimības ārstēšanas metode vēl nav atrasta. Bet diagnostika ir guvusi nopietnus panākumus. HIV tests, kas tiek veikts ar PCR metodi, ir viena no iespējām vīrusa noteikšanai organismā.

Polimerāzes ķēdes reakcija jeb PCR ir viena no modernas metodes HIV diagnoze. Tas ir balstīts uz nukleīnskābju spēju vairoties pašam. Jebkura dzīva organisma šūnā ir olbaltumvielas un nukleīnskābes:

• RNS - ribonukleīnskābe,
• DNS - dezoksiribonukleīnskābe.

Šīs makromolekulas glabā ģenētisko kodu. Ja vīrusu šūnu koncentrācija asinīs ir zema, paraugā nav veselas DNS ķēdes, bet gan to atsevišķie “celtniecības bloki” - nukleotīdi. Polimerāzes ķēdes reakcija atklāj pat šādus vīrusu šūnu "fragmentus". Tas ļauj iegūt rezultātu agrīnās stadijas pēc iespējamas inficēšanās, kad vēl nav parādījušies pirmie klīniskie simptomi.

Visprecīzāko rezultātu var iegūt, analīzei izmantojot venozās asinis. Pāris dienas pirms pārbaudes. Pārtrauciet lietot imūnstimulējošas zāles 2 nedēļas iepriekš.

Biomateriāla paraugs tiek sagremots medicīnas laboratorijas reaktorā. Pēc tam frakcijas apstrādā ar fermentiem. Reaģenti apvienojas ar vīrusa molekulas DNS un dublē to. No vienas šūnas iegūst 2, no 2 - 4, tad 8. Skaitlis pieaug eksponenciāli. Ķēdes reakcija ļauj ātri palielināt vīrusa komponenta daudzumu un padarīt to redzamu laboratorijas tehniķiem.

Norma ir negatīvs rezultāts analīze, kas izskatās šādi: “Vīrusa DNS nav atklāts.” Šī ir atsauces (vidējā statistika) vērtība.

HIV PCR tehnikas priekšrocības un trūkumi

HIV diagnosticēšanai, izmantojot PCR, ir nenoliedzamas priekšrocības, taču ir arī būtiski trūkumi. Pirmajā ietilpst:

• Augsta precizitāte. Kļūdaini negatīvu rezultātu iegūšanas iespējamība ir ārkārtīgi zema.
• Daudzpusība. Pētījumiem ir piemērotas ne tikai asinis, bet arī citi bioloģiskie šķidrumi (maksts izdalījumi, sperma). Tiek izmantotas arī siekalas un urīns, taču rezultāta precizitāte būs zemāka. Šajās vidēs vīrusu šūnu koncentrācija ir nenozīmīga.
• Plašs analīzes klāsts. Vienu biomateriāla paraugu var pārbaudīt uz vairākām slimībām.
• Izpildes ātrums. Polimerāzes ķēdes reakcija ir steidzama diagnostikas metode. Atbildi varēs uzzināt jau nākamajā dienā.
• Pārliecība ir 80%. Izmantojot PCR metodi, vīrusu daļiņas var noteikt pat tad, ja to koncentrācija ir zema. Tas ļauj diagnosticēt slimību agrīnā stadijā un savlaicīgi uzsākt terapiju.
• Agrīna HIV infekcijas diagnostika. Laiks, kad HIV tiek konstatēts asinīs, izmantojot PCR, ir 10-14 dienas pēc iespējamās infekcijas. Tas ir standarta garums imūndeficīta vīrusa diagnosticēšanai. šajā posmā vēl nav atklāti; ELISA metode nedarbojas.
• Nav vecuma ierobežojumu. Šo pārbaudi var veikt bērnam no dzimšanas brīža.

PCR metodes trūkumi HIV diagnostikā:

• Augstākas izmaksas, salīdzinot ar 3. paaudzes enzīmu imūntestu.
• Nepieciešams sarežģīts medicīnas aprīkojums.
• Kļūda ir 20% reakcijas augstās jutības dēļ. Autoimūnām slimībām, ļaundabīgiem audzējiem, hroniskām infekciju PCR var dot viltus pozitīvs rezultāts.

Kam nepieciešama PCR?

• Lai veiktu provizorisku diagnozi, nepieciešama savlaicīga reakcija. PCR palīdz apstiprināt vai atspēkot ELISA rezultātus.
• Imunoblotēšana deva pozitīvu rezultātu. Ja vispirms tiek veikta PCR analīze, tad rezultāta apstiprināšana ar imūnblotēšanu ir obligāta. Pētījumi viens otru papildina. Izmantojot 2 metodes vienlaikus, ārsti novērš kļūdu iespējamību.
• Kad pozitīvs ir apstiprināts, PCR palīdz kontrolēt terapijas efektivitāti.
• Izmanto, lai pārbaudītu donoru asiņu klātbūtni.
• PCR var veikt pat bērniem, kas jaunāki par vienu gadu. Šo metodi izmanto, lai noskaidrotu HIV statusu jaundzimušajiem, kuru mātes ir vīrusa nēsātājas. Pirmajās dzīves dienās veiktā pārbaude parādīs, vai ir notikusi intrauterīna infekcija. Infekcija var rasties, bērnam ejot caur dzemdību kanālu. ko mazulis ieguvis dzemdību laikā, var noteikt pēc 2 - 3 nedēļām.

Cik ilgs laiks nepieciešams, lai veiktu PCR testu, un kur to var iegūt?

HIV PCR testa veikšana un rezultātu atšifrēšana neprasa daudz laika. Asins ņemšana aizņem 5-7 minūtes. Standarta gadījumā laboratorijas tehniķim ir vajadzīgas tikai 24 stundas, lai sagatavotu sertifikātu. Diagnoze ilgst ne vairāk kā 8 stundas, pārējais laiks ir nepieciešams reģistrācijai. Pacients saņem ziņojumu nākamajā darba dienā. veikt 2 stundu laikā.

HIV testi netiek veikti, izmantojot šo metodi. obligātās medicīniskās apdrošināšanas polise. Jūs nevarat saņemt šo pakalpojumu bez maksas valsts klīnikā. Bet gandrīz visās komerciālajās laboratorijās parasti ir nepieciešamo aprīkojumu un reaģenti. PCR pārbaude bieži tiek iekļauta vispārējā HIV skrīningā. Kompleksās diagnostikas cena svārstās no 600 līdz 1000 rubļiem.

Jūs varat pabeigt procedūru anonīmi. Reģistratūrā pacientam tiek piešķirts individuāls numurs, pēc kura viņš uzzinās rezultātu. Mūsdienu medicīnas centri visus datus savā tīmekļa vietnē parāda klienta personīgajā kontā.

Vairākas seksuāli transmisīvās slimības tiek diagnosticētas, izmantojot ELISA un PCR metodes.

Gatavojoties izmeklējumam, pacientiem divas dienas nav vēlams ēst treknu pārtiku. Tāpat kā asins analīzes vīrusiem, paraugi tiek ņemti tukšā dūšā, pēdējā ēdienreize bija ne vēlāk kā pirms 8 stundām. Izslēdziet no uztura ceptu pārtiku un alkoholu. Ievērojot šīs vienkāršās prasības, jūs padarīsit pārbaudes rezultātus tuvākus precīzākiem.

Atklāto slimību sarakstā ietilpst:

• cilvēka papilomas vīruss (HPV);
• hlamīdijas;
• herpes (ir paredzēta papildu asins analīze herpes noteikšanai);
• ureaplazma;
• mikoplazma;
• gonoreja;
• citomegalovīruss;
• trichomoniāze;
• toksoplazmoze.

PCR HIV noteikšanai infekcijas diagnostikā

Tā kā nav zināmi tikai HIV infekcijai raksturīgi simptomi, pamatojoties tikai uz pieteikušās pacienta sūdzībām, HIV infekciju atpazīt nav iespējams.

HIV testēšana ir kļuvusi par nepieciešamību, jo... Pašreizējais sabiedrības viedoklis par šo slimību ir tāds, ka AIDS tiek uzskatīts par nāvessodu. Ir bijuši gadījumi, kad pēc neregulāriem dzimumkontaktiem cilvēks pievērš pastiprinātu uzmanību sava ķermeņa signāliem, atrodot un nereti izdomājot jaunas letālas slimības pazīmes.

Pētījumu veikšana laboratorijas apstākļos šobrīd ir vienīgā un uzticamākā diagnostikas iespēja (asins analīzes HIV noteikšanai). PCR izmanto, lai noteiktu šādas veselības problēmas:

• apstiprināt vai atspēkot HIV klātbūtni seronegatīvā loga laikā;
• ja imūnblota rezultāts ir apšaubāms (lai noteiktu precīzs apraksts patoloģisks process);
• nosakot HIV-1 vai HIV-2 genotipu;
• noteikt un uzraudzīt organisma vīrusu slodzi;
• noteikt HIV statusu jaundzimušajiem, kuru mātes ir HIV nēsātājas;
• asins pārliešanas laikā.

PCR metodes pārākums diagnostikā infekcijas slimības:

Kad pacientam, kurš vērsies pēc medicīniskās palīdzības, tiek konstatēts pozitīvs HIV infekcijas rezultāts, viņi sāk veikt padziļinātākus pacienta pētījumus, lai noskaidrotu un noskaidrotu slimības būtību un gaitu, kā arī pamatu un būtību. sekundāro slimību un imunitātes bojājumu līmeni.

ELISA un PCR analīzes: pētījuma iezīmes, principi un interpretācija

Asinis analīzei tiek ņemtas no vēnas. Grūtniecības laikā asins paraugi AIDS noteikšanai tiek ņemti stingri. Secinājumi par imūndeficīta vīrusa neesamību vai klātbūtni pacienta organismā tiek izdarīti, pamatojoties uz antivielu esamību vai neesamību. ELISA nevajadzētu veikt uzreiz pēc aizdomām par infekciju, bet pēc kāda laika, lai pacienta asinīs veidotos antivielas. Iziet cauri dažādu iemeslu dēļ no 3 nedēļām līdz 3 mēnešiem.

Turklāt tika atklāts, ka ELISA rezultāts var būt gan viltus pozitīvs, gan viltus negatīvs. Ļoti agri diagnosticējot aizdomīgu infekciju, kad vēl nav parādījušās antivielas pret HIV, tiek iegūts kļūdaini negatīvs rezultāts. Šādos gadījumos, lai noskaidrotu, jums pēc 1-3 mēnešiem atkārtoti jāpārbauda asinis uz HIV.

Kļūdains pozitīvs rezultāts, gluži pretēji, var tikt iegūts, ja pacientam ir hroniskas infekcijas, vēzis, autoimūnas slimības, papildus uzskaitītajām, novirzes no normas ir iespējamas arī citās situācijās. Tāpēc, ja ELISA rezultāts ir pozitīvs, tas noteikti tiek atkārtoti pārbaudīts, izmantojot visjutīgākās metodes.

PCR diagnostika ir viena no mūsdienu modernākajām pētniecības metodēm un diezgan bieži tiek izmantota infekcijas slimību identificēšanā. DNS diagnostikā ir iekļautas vairākas dažādas pētījumu veikšanas metodes, mūsdienās populārākā metode ir polimerāzes ķēdes reakcija jeb PCR.

Šīs metodes pamatā ir nelielas konkrētas infekcijas izraisītāja DNS daļas atrašana audos mikropētījumam. Šajā gadījumā neliela DNS daļa satur līdz pat vairākiem simtiem DNS pāru, kas ir stingrā kārtībā.

PCR metode ir visprecīzākā, to var izmantot, lai noteiktu vīrusa klātbūtni neatkarīgi no tā, vai antivielas parādās vai nē. Bet, neskatoties uz tās precizitāti, metodei ir viens nopietns trūkums, ko tieši izraisa tās paaugstinātā precizitāte. Pastāv diezgan liela varbūtība, ka rezultāts būs nepatiess. Tāpēc saistībā ar šo metodi un papildus tai tiek izmantotas arī citas metodes ģenētisko un antigēno materiālu noteikšanai.

Hepatīta diagnostikas būtība, izmantojot PCR

Ir pieci pierādīti vīrusi, kas izraisa aknu slimības. Tie ir labi zināmie hepatīta vīrusi A, B, C, D, E. Ļoti reti ir gadījumi, kad hepatītu izraisa Epšteina-Barra vīruss, kas patiesībā ir herpes veids. Uzskaitītie vīrusi ir dažādu ģimeņu pārstāvji, kas ietekmē to ārstēšanu atkarībā no hepatīta veida.

Viena no precīzākajām un uzticamākajām molekulārās ģenētiskās diagnostikas metodēm ir PCR, tas ir, polimerāzes ķēdes reakcija. Šī metode ļauj pacientam diagnosticēt dažāda veida iedzimtas un infekciozas slimības.

PCR pētījumi ļauj diagnosticēt vienu no tādām sarežģītām slimībām kā, kuru ir grūti ārstēt. HIV PCR ticamība ir pamatota tikai 80 gadījumos no 100.

Galvenais HIV infekcijas noteikšanas veids cilvēka organismā ir ar viņa asinīm, tas ir, tiek veikta šīs slimības pārbaude. Vienkāršākā un visizplatītākā diagnostikas metode ir venozo asiņu ņemšana un vadīšana īpašā laboratorijā. Protams, iegūtais pozitīvais rezultāts var būt nepatiess, tāpēc tas tiek atkārtoti pārbaudīts precīzākā pētījuma veidā references laboratorijā.

Polimerāzes ķēdes reakcija tiek uzskatīta par diezgan dārgu procedūru, un tās īstenošanai ir nepieciešams īpašs aprīkojums un augsti kvalificēti speciālisti. Šī iemesla dēļ tas nav kļuvis plaši izplatīts iedzīvotāju vidū.

PCR analīzes izmantošana HIV diagnosticēšanai ļauj iegūt precīzu un ticamu rezultātu par slimības klātbūtni, taču tas bieži ir atkarīgs no paša pacienta sagatavotības.

PCR analīze tiek veikta šādos gadījumos:

1. HIV infekcijas diagnostika jaundzimušajiem, kas dzimuši no mātes, kas inficēta ar AIDS.
2. Lai kontrolētu HIV koncentrāciju pacienta asinīs
3. Donoru asiņu pārbaude.

Pat ja PCR tests uzrāda pozitīvu rezultātu, diagnozi nevar noteikt, izmantojot tikai šo testu. Visbiežāk to izmanto kā papildu metode strīdu risināšanai.

Diemžēl PCR analīzi nevar saukt par universālu metodi, kuras ieviešana dod precīzus rezultātus par infekcijas esamību vai neesamību cilvēka organismā. Tas ir saistīts ar faktu, ka šāda veida pētījumi biežāk nekā citas metodes dod viltus pozitīvus rezultātus. Šo diagnostikas metodi izmanto, diagnosticējot slimību vai pārbaudot HIV infekciju. To galvenokārt izmanto kā palīgmetodi AIDS vīrusa diagnosticēšanai.

Tomēr, neskatoties uz viltus pozitīva rezultāta iespējamību, šādam HIV testam ir vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar citām diagnostikas metodēm. PCR analīzi var veikt jau 11-15 dienas pēc aizdomas par inficēšanos, un visas pārējās metodes ļauj novērtēt AIDS vīrusa klātbūtni cilvēka organismā tikai pēc ilgāka laika. Šī neatbilstība skaidrojama ar to, ka lielākā daļa HIV skrīninga testu ir balstīti uz vīrusa noteikšanu, kura veidošanās notiek trīs mēnešu laikā.

Galvenā atšķirība starp PCR testēšanu un citām diagnostikas metodēm ir tā, ka tā atklāj nevis vīrusu, bet gan paša vīrusa klātbūtni pacienta organismā.

Šī iemesla dēļ polimēru ķēdes reakcijas metodi var saukt par ideālu, ja ir nepieciešama priekšlaicīga noteikšana. Turklāt šo metodi var izmantot gadījumos, kad antivielu klātbūtne nevar būt uzticams rādītājs.

Vairāk informācijas par HIV testēšanu var atrast video.

Ja ir nepieciešams noteikt patoloģijas pakāpi vai smagumu cilvēka ķermenī, viņi izmanto kvantitatīvu PCR pētījumu. Tas ļauj iegūt informāciju par infekcijas koncentrācijas līmeni pacienta organismā. Slimības progresēšanu pavada pakāpeniska vīrusa koncentrācijas palielināšanās, un kvantitatīvā PCR diagnostika ļauj noteikt infekcijas stadiju un ārstēšanas efektivitāti. “Vīrusu slodzes” diagnostika pirms slimības noteikšanas un pēc ārstēšanas ļauj izdarīt secinājumu par ārstēšanas efektivitāti.

Citas HIV diagnostikas metodes

Mūsdienās HIV infekcijas diagnosticēšana ir standarta procedūra, kas ietver izmantošanu dažādi veidi diagnostika:

ELISA testu sistēmas

Veicot šādu skrīninga testu, vīrusu ir iespējams atklāt dažu nedēļu laikā pēc tā nonākšanas cilvēka organismā. Šāds pētījums nav vērsts uz vīrusa klātbūtnes noteikšanu pacientam, bet gan uz to, lai diagnosticētu antivielu veidošanos pret to. Ir vairākas ELISA testu paaudzes, un katrai no tām ir atšķirīga jutība. Šāds tests dažreiz dod rezultātus, kas izskaidrojams ar nepareizu apstrādi un dažāda veida patoloģiju klātbūtni pacienta ķermenī.

Imūnblotēšana

Ja imūnblotēšana uzrāda pozitīvu rezultātu, mēs varam runāt par galīgās HIV diagnozes noteikšanu. Galvenais veids, kā to izdarīt, ir izmantot nirocelulozes sloksni, uz kuras tiek uzklāti vīrusu izcelsmes proteīni.

Ekspres metodes

Tas tiek uzskatīts par jaunumu HIV infekcijas diagnostikas jomā, un rezultātus var novērtēt dažu minūšu laikā pēc to veikšanas. Visprecīzākos un uzticamākos rezultātus iegūst imūnhromatogrāfiskie testi, kuru izmantošanas pamatā ir kapilārās plūsmas princips.

Par HIV infekcijas klātbūtni organismā var runāt tikai pēc ELISA testu apstiprināšanas ar IB analīzi.

HIV infekcijas diagnosticēšana cilvēka organismā ievieš būtiskas izmaiņas ierastajā dzīvesveidā un attiecībās ar citiem. Medicīniskā personāla pienākums ir glabāt izmeklējumu rezultātus, un lēmumu par to, kam informēt par savu slimību, pieņem tikai pats pacients. PCR ir viena no diagnostikas metodēm, kas ļauj noteikt vīrusa klātbūtni cilvēka organismā tikai dažu nedēļu laikā.

Saskaņā ar PVO statistiku, vairāk nekā 40 pēdējos gados 25 miljoni cilvēku ir miruši no AIDS. Šīs infekcijas radītais kaitējums ir milzīgs. Lielākā daļa inficēto bija Āfrikas valstīs, kur šī infekcija radusies. Ar HIV slimības diagnosticēšana kļūst īpaši svarīga. Tiesa, HIV ārstēšanas līdzekļi vēl nav radīti, taču agrīna terapija var pagarināt pacienta dzīvi un uzlabot tā kvalitāti.

HIV infekcijas diagnostika

HIV infekciju nosaka dažādi posmi izmantojot šādas metodes:

• ELISA - enzīmu imūntests.
• Western blot.
• PCR - polimerāzes ķēdes reakcija.
• Ekspress testi.

PCR metodi izstrādāja amerikāņu bioķīmiķis Karijs Mulliss, kurš par to saņēma balvu 1983. Nobela prēmija. Mūsdienās šī metode medicīnā visu infekciju diagnosticēšanai tiek uzskatīta par vadošo tās precizitātes un informācijas satura dēļ. HIV šajā ziņā nav izņēmums.

Analīzes būtība

Katra dzīvā šūna satur RNS un DNS. Šīs nukleīnskābes spēj paškopēt un vairoties. Katrai infekcijai ir unikāli DNS fragmenti. Šie nukleīnskābju fragmenti cirkulē bioloģiskajos šķidrumos. Tos notver un atpazīst speciāla tehnika – reaktors. Tas ir metodes pamatā. Laborants šos fragmentus saskaita. Tiek uzraudzīta HIV retrovīrusa RNS. Pat ar atsevišķām vīrusu daļiņu kopijām PCR var tās noteikt un saskaitīt.

Kā testa šķidrumu visbiežāk izmanto venozās asinis. Speciālie metodes komponenti mijiedarbojas ar vīrusu daļiņām un padara tās nosakāmas, jo atrastie fragmenti tiek pavairoti.

HIV gadījumā vīrusa klātbūtnes rezultātu var iegūt ilgi pirms klīnikas parādīšanās. Tāpēc, pateicoties tā augstajai jutībai, PCR ir tik augsta diagnostiskā vērtība. Liela PCR priekšrocība ir metodes daudzpusība. Inkubācijas periods infekcijas nav šķērslis PCR.

Pētījuma izmaksas

PCR metode ir diezgan dārga. Tas ir viens no tā lielākajiem trūkumiem. Lai to veiktu, nepieciešams jaunākais aprīkojums un augsti kvalificēts laboratorijas ārsts. Sakarā ar iepriekš minēto, PCR diagnostika netiek veikta mazos apdzīvotās vietās. Jūs varat veikt pārbaudi tikai specializētās lielajās klīnikās.

HIV DNS noteikšanas izmaksas Maskavas klīnikās sākas no 2800 rubļiem, vīrusu slodzes noteikšana, izmantojot PCR (vīrusu RNS plazmā) - no 8800 rubļiem, un HIV rezistence pret proteāzes inhibitoriem - no 16500 rubļiem. Kā redzat, cenas ir diezgan augstas. PCR var veikt bez maksas valsts klīnikās saskaņā ar obligātās medicīniskās apdrošināšanas polisi. Ir svarīgi, lai procedūru varētu veikt anonīmi. Reģistratūrā pacients saņem numuru, pēc kura viņš var uzzināt rezultātu. Mūsdienu medicīnas centros ir personīgie konti klientiem, kur šie dati tiks ievadīti.

Pētījuma mērķi

HIV PCR diagnostika tiek noteikta šādos gadījumos:

• Infekcijas noteikšana bērnam, kas dzimis no slimas mātes vai nēsātājas, lai noteiktu intrauterīnu infekciju.
• Ja ELISA deva apšaubāmus rezultātus (HIV PCR palīdz šajā gadījumā noteikt galīgo diagnozi).
• Lai identificētu vīrusa kvantitatīvo saturu organismā.
• Ja imūnblotēšana ir pozitīva, tie un PCR papildina viens otru.
• Donoru pārbaude.
• HIV agrīnai diagnostikai.
• Lai noteiktu efektivitāti un izturību pret ART.

Šīs analīzes priekšrocība ir tāda, ka HIV PCR var veikt pat bērniem līdz viena gada vecumam.

Pētījums bieži tiek veikts nevis primārajai diagnostikai, bet gan ārstēšanas procesa laikā. Primārā diagnoze ir seroloģiskie testi (tie nosaka antivielu līmeni pret HIV). Kļūdaini pozitīva rezultāta gadījumā to atkārto – tas var būt tad, kad vīrusu slodze ir zema.

PCR diagnosticē HIV, ja vēl nav antivielu pret to. ELISA metode šajā gadījumā nedos atbildi.

Un PCR tests uz HIV jau būs pozitīvs. Bet šī HIV perioda simptomi ir nespecifiski. Pacientam vispirms tiek veikta ilgstoša un neveiksmīga ARVI ārstēšana no ģimenes ārsta. Jāpatur prātā, ka HIV diagnozi nevar noteikt, pamatojoties tikai uz PCR, ir nepieciešami arī citi visaptveroši testi. PCR metode bieži vien kalpo kā palīgmetode sarežģītos gadījumos.

Gatavošanās analīzei

Pirms PCR testa veikšanas HIV noteikšanai, 2 dienas pirms testa jums jāizvairās no treknu pārtikas produktu un alkohola lietošanas. Tāpat labāk nenoslogot sevi garīgi un fiziski. Ja pacientam tiek nozīmēts imūnstimulācijas kurss, tas tiek pārtraukts 2 nedēļas pirms pārbaudes.

Labāk ir nodot asinis no rīta. Var izmeklēt arī citus ķermeņa bioloģiskos šķidrumus (spermu, maksts sekrēciju), bet labākais materiāls ir asinis. Siekalas, sviedri, urīns un asaras netiek izmantotas, jo vīrusu saturs tajās ir minimāls.

PCR priekšrocības HIV

Metodes priekšrocības ir ārkārtīgi zemā viltus pozitīva rezultāta iespējamība, reakcijas universālums jebkuriem ķermeņa bioloģiskajiem šķidrumiem. Analīzei ir plašs diapazons:

• Lai noteiktu dažādas infekcijas, var izmantot vienu asins ņemšanu.
• Tehnika ir steidzama, rezultāts ir gatavs nākamajā dienā.
• Pārliecība svārstās no 85 līdz 98%.
• HIV klātbūtni var noteikt 10-14 dienas pēc inficēšanās (pašlaik antivielas vēl nav pieejamas).
• Nav vecuma ierobežojumu, to var veikt uzreiz no dzimšanas brīža.

Metodes trūkumi

PCR trūkumi ir šādi:

• Analīzes dārgums.
• Nepieciešams sarežģīts medicīnas aprīkojums.
• Nepieciešams augsti kvalificēts laboratorijas tehniķis un ārsts, kas veic analīzi.
• Reakcija ir ļoti jutīga, tāpēc kļūda var būt 20%.
• Viltus pozitīvs rezultāts var rasties, ja pacientam ir autoimūni procesi, onkoloģija vai hroniskas infekcijas.
• Laboratorijas telpās nepieciešama īpaša tīrība, jo vīruss analīzē var iekļūt no gaisa. Tad rezultāts būs nepareizs.

Laboratorijām, kurās tiek veikta PCR, diagnostikas kvalitātes uzlabošanai ir izstrādāti īpaši stingri pasākumi saskaņā ar SanPiN sistēmu iekšējai kontrolei. Turklāt, izmantojot šo paņēmienu, jāievēro visi darbības noteikumi:

• Jums stingri jāievēro informācija uz mēģenēm.
• Pirms asiņu ņemšanas pārbaudiet vēlreiz un pārliecinieties, ka tests ir nozīmēts.
• Medmāsai pareizi jāmarķē caurules.
• Laboratorijas ārstam pareizi jāveic visas manipulācijas ar biomateriālu, lai novērstu savstarpēju inficēšanos.
• Pārbaudes sistēmai jābūt izcilas kvalitātes.

Tikai tad, ja ir izpildīti visi šie nosacījumi, kļūda atbildē var būt tikai aptuveni 2% epizožu.

Analīzes ilgums

Daudzi cilvēki interesējas par to, cik ilgs laiks būs nepieciešams, lai HIV PCR tests būtu gatavs. Diagnoze ilgst ne vairāk kā 8 stundas. Pacients atbildi var saņemt jau nākamajā dienā. Ekspress testēšana tiek veikta 2 stundu laikā.

PCR uzticamība

Neskatoties uz daudzajām priekšrocībām, PCR netiek uzskatīta par ideālu diagnostikas metodi. Pie viņa vēršas, ja nepieciešams veikt skrīninga testus HIV klātbūtnei organismā.

Kad tiek ņemtas asinis analīzei?

Cik ilgs laiks nepieciešams, lai veiktu PCR testu HIV noteikšanai? Uzticamu rezultātu var iegūt, noņemot asinis 4-4 dienas pēc iespējamās infekcijas. Pēc 2 nedēļām HIV precizitāte būs 98%, bet pēc 5 dienām - 80%. PCR rezultātu klātbūtne būs ticama, taču absolūti precīzam rezultātam tiek veikta arī ELISA.

ELISA tests būs efektīvs tikai tad, ja būs antivielas pret vīrusu, šis laiks var ilgt no 1-3 mēnešiem līdz sešiem mēnešiem. Tā kā ELISA dod lielāku varbūtību (98%-99,9%), PCR nevar saukt par 100% apstiprinošu testu HIV infekcijas klātbūtnei. Bet šī ir vienīgā metode, kurā jums nav jāgaida, līdz parādīsies antivielas.

HIV gadījumā PCR metode var sniegt informāciju par ART efektivitāti, HIV slimības stadiju un VL daudzumu (kvantitatīvs HIV klātbūtnes novērtējums organismā). Tas norāda uz izmaiņu nopietnību un apjomu.

Tāpat ir nepieciešams veikt PCR testus HIV noteikšanai, ja asinīs ir antivielas, bet to klātbūtne neliecina par HIV infekcijas klīnisko pārliecību.

Pārbaudes tiek veiktas ne tikai infekcijas un gadījuma dzimumakta gadījumos. Citi iemesli:

• Grūtniecības plānošana.
• Gaidāmā operācija.
• Ikdienas dzimumakts.
• Dažām profesijām ir nepieciešams, lai šis tests varētu strādāt (skolotāji, ārsti un citi medicīnas darbinieki).
• Ieslodzītie.
• TB pacienti.
• Neatliekamās palīdzības dienesti un policijas darbinieki.
• Tie, kas atgriežas pēc atvaļinājuma no eksotiskām valstīm (ja vēlas, pārliecinieties, ka nav infekcijas).
• Prostitūtas.
• Starptautiskie studenti.
• Narkomāni.

Turklāt daži pacienta simptomi var likt jums veikt HIV testu:

• Pēkšņs svara zudums.
• Caureja, kas ilgst vairāk nekā 3 nedēļas.
• Nepamatots temperatūras pieaugums ilgu laiku.
• Palielināti limfmezgli.
• Neizskaidrojams pneimonijas, kandidozes u.c. cēlonis.

Analīzes atšifrēšana ir ārstējošā ārsta, nevis laboranta prerogatīva.

PCR vai ELISA, kas ir labāks?

Kad vīrusa RNS tiek atklāts gan kvalitatīvi, gan kvantitatīvi. Šis tests skaidri identificē konkrētu patogēnu pat tad, ja ir vairāki savstarpēji reaģējoši patogēni. Bioloģisko materiālu var izmantot pat žāvētā veidā. Negatīvā puse ir PCR augstā jutība, kad viltus pozitīvu rezultātu var izraisīt pat niecīga svešas DNS klātbūtne uz instrumentiem vai mēģenē.

ELISA uzdevums un iespēja ir noteikt retrovīrusa antivielu klātbūtni. Lai gan tā precizitāte ir 99%, tā nav piemērojama sākuma stadijā.

Kvalitatīvs HIV tests

Augstas kvalitātes PCR veikšana HIV noteikšanai nosaka vīrusa klātbūtni organismā. Rezultāti šajā gadījumā izskatīsies šādi: pozitīvi, viltus pozitīvi, negatīvi. Bet šis pētījums nesniegs informāciju par retrovīrusa daudzumu. Šāda kvalitatīva analīze ir nepraktiska, ja HIV infekcija organismā jau ir konstatēta ar citiem līdzekļiem.

Nav iespējams kontrolēt ārstēšanas efektivitāti ar augstas kvalitātes PCR.

Kvantitatīvais HIV tests

To veic tikai ar HIV inficētiem cilvēkiem, lai saskaitītu vīrusa RNS kopiju skaitu bioloģiskā produktā.

Šāda pētījuma mērķis ir uzraudzīt ārstēšanu un noteikt vīrusa rezistenci pret to. Pretvīrusu terapiju šādos aprēķinos ārsts nav parakstījis akli, un tāpēc tā būs efektīvāka. Kvantitatīvā PCR HIV infekcijai tiek veikta daudz biežāk. Šī analīze tiek parādīta kopijās/ml asiņu.

Kādus rezultātus var sniegt:

• Vīrusa RNS nav vai ir ļoti maz (apmēram 20 kopijas/ml). Nav pārliecības par diagnozi.
• No 20 līdz 10 līdz 6 grādiem kopijas/ml - diagnoze ir uzticama.
• Vairāk par 10 līdz 6 kopijām/ml – liela VL.

Laboratorijas var veikt reāllaika HIV PCR testēšanu. Tas nozīmē PCR produktu uzkrāšanās novērošanu un skaitlisku novērtēšanu, vienlaikus automātiski reģistrējot rezultātus.

Tas, ka 30 gadus mūs apmānīja HIV/AIDS, ir medicīnisks fakts, kam vairs nav vajadzīgi pierādījumi. Negribu nevienu aizvainot, bet patiesība ir tāda, ka šobrīd, manā priekšā esot visa pieejamā informācija par alternatīvo skatījumu, tas ir, ko pasniedz HIV disidenti, turpināt vienkārši nav iespējams un naivi. ticu mākslīgi radītai un ar ciniskas un mānīgas HIV/AIDS teorijas propagandas palīdzību uzspiestai.

Ja paudāt savu neizpratni par to, ka HIV diagnostikas testi nekonstatē pašu vīrusu, bet tikai antivielas pret to, un tas attiecas ne tikai uz enzīmu imūnsorbcijas testu, bet arī uz imūnblotēšanu, kas tiek uzskatīta par precīzāku, tad droši vien esat dzirdējuši ārstu vai dažu zinošu cilvēku apliecinājumus, ka pastāv polimerāzes ķēdes reakcijas metode, kurai nav nekāda sakara ar antivielām, bet gan tieši nosaka pašu vīrusu.
Vai esat dzirdējuši par PCR diagnostikas metodi un jo īpaši par HIV infekciju? Noteikti. Vai esat mēģinājis tajā nedaudz iedziļināties un izdomāt? Nē? Tātad ir skaidrs, ka mūs apmāna? Labi. Bet tagad es to skaidri parādīšu, uz pirkstiem...

Jā, mēs esam patiesi klaji un ciniski maldināti, kad viņi mums apliecina, ka PCR tests uz HIV nosaka paša vīrusa klātbūtni vai tā koncentrāciju asinīs, tas ir, vīrusu slodzi. Un es uzreiz teikšu, ka šajā ziņā PCR metode ne tikai neatšķiras no ELISA un IB, bet var teikt, ka tā ir tieši balstīta uz tieši tādu pašu principu.
Ko tas nozīmē? Atgādināšu, ka diagnostikas HIV testi ELISA un Immunoblot ir balstīti uz testa paraugā esošo antivielu reakciju ar vīrusa antigēniem, kas ievietoti pašā testā. Kas ir testu sistēmās kā šie HIV proteīni - to zina tikai Dievs, un droši vien ne viss. Attiecīgi ir pilnīgi neskaidrs, kuras antivielas reaģē ar šīm iespējamām HIV olbaltumvielām, kā rezultātā tiek izveidots 62 punktu saraksts ar slimībām un stāvokļiem, kas izraisa viltus pozitīvu reakciju.

Kas ir polimerāzes ķēdes reakcijas metodes pamatā un kā tā tiek diagnosticēta infekcijas slimībām? Hepatīta un HIV gadījumā tiek pārbaudītas pacienta asinis. Lai noteiktu konkrēta patogēna klātbūtni pētāmajā asins paraugā, PCR testēšanai tiek izmantots primers, tas ir, paša patogēna DNS fragments, kas papildina noteiktu tā DNS daļu, tas ir, būtībā primer ir pievienots DNS sadaļai tādā pašā veidā, kā sekcijas ir savienotas viena ar otru DNS dubultspirāli.
Vai jūs to saprotat? Tiek paņemtas tavas asinis, tad tām tiek pievienots kaut kas, kas it kā neapšaubāmi ir unikāla HIV vīrusa genoma sastāvdaļa, pievienotas citas nepieciešamās sastāvdaļas, pēc tam visu trīsdesmit reizes karsē un atdzesē, un rezultātā - voila! tu esi HIV pozitīvs! jūsu vīrusu slodze ir 3 miljoni! nekavējoties sāciet terapiju!

Bet pagaidiet. Vai jūs neredzat, kā jūs esat apmānīts jau no paša sākuma?
Jūs esat pārliecināts, ka PCR metode nosaka pašu vīrusu. Bet šis absolūti meli! PCR metode šajā ziņā neatšķiras no ELISA un IB! Tāpat kā testu sistēmās HIV antigēnu aizsegā tiek izmantotas nezināmas lietas, tāpat PCR testos, aizsedzot primerus, kas nodoti kā daļa no paša HIV DNS, tāpat tiek izmantota pilnīgi nezināma viela. Jūs saprotat, ja HIV neeksistē, tad nevar būt ne runas par HIV DNS vai HIV RNS, vai antivielām pret HIV, jo īpaši mātes antivielām, ar kurām viņi mūs maldina, stāstot, ka visi bērni no HIV pozitīvām mātēm. , un otrajā dzīves gadā pazūd paši...

Tāpat kā šis.
- PCR metode atklāj pašu HIV vīrusu, šeit nevar būt ne kļūdu, ne šaubu! Un šī visprecīzākā metode parāda vīrusu slodzi, kas ir ļoti svarīga slimības un tās ārstēšanas dinamikas uzraudzībai!
- Nu, nu... Tu runā par pašu vīrusu? Kas tiek izmantots kā gruntējums? Tas pats vīruss? Tas pats, ko Montanjē un Gallo atklāja pirms 30 gadiem? Vai viņi tiešām viņu atrada? Tiešām sakopts? Vai tiešām fotografējāt? Vai tiešām ir pierādīts, ka replikācijai/vairošanai izmanto T-limfocītus, kā rezultātā to kopējais skaits tiek izsmelts un rodas bīstams imūndeficīts? Vai tas viss ir taisnība?

Un būtībā PCR metode AIDS gadījumā tiek izmantota ne tik daudz pateicoties tās izgudrotājam Karijam Mullisam (drīzāk pat pretēji viņa viedoklim!), bet gan Montanjai un Gallo, kuri izvilka HIV no zila gaisa un kuru DNS praimeri. tiek izmantoti HIV PCR diagnostikā...

Tātad šeit tas ir. Ja jums ir teikts, ka, pamatojoties uz PCR testu rezultātiem, esat HIV pozitīvs un jums ir augsta vīrusu slodze vai mēs runājam par jūsu bērnu, neuztraucieties ne mirkli! jūs tiekat klaji maldināti! Polimerāzes ķēdes reakcijas metodes izgudrotājs, mikrobiologs Karijs Mulliss ir HIV disidents, un viņš ir kategoriski pret PCR izmantošanu HIV diagnostikā, jo labi saprot, ka neesoša HIV vīrusa gadījumā tas ir vienkārši. klaja ciniska maldināšana...

Vēl viens mirklis. Vai esat dzirdējuši par nenosakāmu vīrusu slodzi? Fakts ir tāds, ka ne visi HIV pozitīvie cilvēki, pārbaudot vīrusa daudzumu asinīs, iegūst noteiktu rezultātu, kas atkarībā no vērtības tiek uzskatīts par zemu vai augstu vīrusu slodzi. Ja tādu cilvēku būtu ļoti maz, par viņiem vispār nerunātu. Bet fakts ir tāds, ka viņu acīmredzot ir daudz, un tāpēc viņi runā par nenosakāmu vīrusu slodzi HIV infekcijā. Es neminēšu PR terapiju, kas it kā samazina VL līdz nenosakāmam. Nē, lieta ir tāda, ka bez jebkādas terapijas daudziem cilvēkiem tas netiek atklāts. Nekad.
Proti, pacientam ir konstatēta HIV infekcija, taču, izmantojot slaveno ultrajutīgo, kosmosā precīzo PCR diagnostikas metodi, HIV vīrusu viņa organismā atrast nav iespējams. Kā tā?

Un tad mums saka, ka metode, protams, ir unikāla, bet mūsdienu tehniskie līdzekļi joprojām uzliek ierobežojumus, un visvairākaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaar laiku nevar noteikt.

Tas ir, pacientam neapšaubāmi ir HIV. Vīruss ir neārstējams, neiznīcināms, viltīgs, mānīgs, ļaunprātīgs, ārkārtīgi gudrs un izgudrojošs. Un pat supermaģiskā PCR metode nespēj noteikt, kur no zinātniekiem un ārstiem slēpjas viltīgais vīruss.
Izrādās, ka, no vienas puses, viņi mums stāsta, kas ir brīnišķīga un ļoti precīza PCR metode, tā no vienas molekulas var uzminēt veselu ziloni un pat vali - un, no otras puses, ar nokarenām acīm viņi murmina. neskaidri par nenosakāmo vīrusu slodzi tūkstošiem pacientu, kuri jau vairākus gadu desmitus dzīvo ar HIV infekcijas diagnozi un nesaņem pretretrovīrusu ārstēšanu.

Tādas lietas. Viņi mūs apmāna, kā vien vēlas. Nebaidieties idioti. Neuzņemieties neviena ārsta vai zinātnieka vārdu. Viņi trīsreiz septiņas reizes pastāstīs par PCR testu kosmisko precizitāti, taču tikai viena piezīme par šajā gadījumā izmantotajiem HIV primeriem acumirklī sagrauj visu lielisko ainu. Jo prieka pēc varam teikt, ka tāpat kā Gallo patentēja pirmos HIV testus, kad atklāja viltotu HIV vīrusu, tāpat viņš varēja patentēt HIV primerus HIV infekcijas PCR diagnostikai, jo primeri būtībā ir tas pats, ka HIV. antigēni ir dažas specifiskas bioloģiskas vielas, kas raksturīgas tikai šim vīrusam (genoma fragmenti vai specifiski proteīni)...